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pISSN 2384-2458 eISSN 2288-7261
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Report On Proficiency Testing

J Lab Med Qual Assur 2019; 41(3): 130-152

Published online September 30, 2019

https://doi.org/10.15263/jlmqa.2019.41.3.130

Copyright © Korean Association of External Quality Assessment Service.

Annual Report of Korean Association of External Quality Assessment Service on Histocompatibility Testing (2018)

Eun-Suk Kang

Department of Laboratory Medicine and Genetics, Samsung Medical Center, Sungkyunkwan University School of Medicine, Seoul, Korea

Correspondence to:Eun-Suk Kang
Department of Laboratory Medicine and Genetics, Samsung Medical Center, Sungkyunkwan University School of Medicine, 81 Irwon-ro, Gangnam-gu, Seoul 06351, Korea
Tel: +82-2-3410-2703 Fax: +82-2-3410-2719 E-mail: eskang@skku.edu

This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.

Here, we report the results of the first histocompatibility proficiency testing (PT) performed by the Korean Association of External Quality Assessment Service in 2018. The directly prepared PT specimens of whole blood, sera, and mononuclear cell suspensions were distributed to participants biannually. The number of participants was comparable to that in the previous external PT program, and the response rate was 88%–100%. The accuracy rates for human leukocyte antigen (HLA) A, B, C, DR, and DQ low and high resolution typing were 100%/100%, 100%/98%, 100%/99%, and 99%/98%, respectively; HLA-B27 typing, 99.1%; T cell and B cell crossmatching, 3.1% and 6.0%, respectively; and HLA antibody screening and identification, 100% and 100%, respectively. The results of HLA crossmatching were not reported from four participants due to poor cell viability. Further improvements of the specimen delivery process, grading criteria for crossmatching, and format of participant summary are warranted.

Keywords: Histocompatibility, Proficiency testing, Korean Association of External Quality Assessment Service

조직적합성(histocompatibility)검사는 성공적인 이식을 위해서는 필수적인 검사이다. 조직적합성항원(human leukocyte antigen, HLA) 또는 주조직복합체(major histocompatibility complex) 형별검사(HLA typing)는 장기 및 조혈모세포 이식 전 최적의 공여자를 선별하고, HLA 교차시험(HLA crossmatching) 및 HLA 항체검사(HLA antibody testing)를 통해 부적합 공여자를 배제하고 이식 후 경과를 예측하는 데 중요한 정보를 제공한다. 일부 특정 HLA형은 질병연관성이 높아 특정 질병을 진단하는 것에 이용된다. 특히 국내에서 이식을 위한 타인 공여자의 매칭은 질병관리본부 장기이식관리센타(Korean Network for Organ Sharing)의 중앙화된 정보시스템을 통해 이루어지고 있으며 이때 여러 다른기관에서 시행후 입력한 검사결과를 바탕으로 선정하게 된다. 그러므로 기관 간 HLA검사의 표준화와 호환성은 매우 중요하다.

국내에서는 1993년 설문조사를 통해 18개 기관이 HLA검사를 시행하고 있음을 확인한 이후 지속적으로 검사시행기관이 증가되어 왔다[1]. 국내 외부정도관리프로그램은 Park 등[2]이 국내 프로그램을 개발하고자 1996년부터 1998년에 걸쳐 국가연구비 기반의 시범사업으로 시작하였으며, 2000년도부터는 대한진단검사의학회 정도관리분과 사업의 일환으로 본격적으로 진행되어 2017년도까지 지속되었다. 대한임상검사정도관리협회는 2017년 국가 질 관리료 산정에 따른 기관평가가 도입됨에 발맞추어 차세대신빙도조사사업의 일환으로 차세대전산시스템의 도입과 더불어 분야 및 항목의 확대를 추진하여 왔으며 2018년 조직적합성검사 외부정도관리프로그램을 도입하였다. 따라서 18년간 지속해온 대한진단검사의학회 정도관리분과의 조직적합성 외부정도관리프로그램은 중단되고 현재의 프로그램으로 대체되었다.

조직적합성검사프로그램은 진단면역학 대분류 내 중분류에 해당하며 소분류에 기존의 외부정도관리프로그램과 동일하게 조직적합성 형별검사(HLA typing), 특수조직적합성 형별검사(HLA-B27 typing), 조직적합성 교차시험검사(HLA crossmatching), 그리고 조직적합성 항체검사(HLA antibody testing) 항목을 포함하며 연 2회에 걸쳐 진행되었다.

이에 저자는 2018년 대한임상검사정도관리협회에서 시행된 첫 조직적합성검사 신빙도조사 결과와 내용을 보고하고자 한다.

1. 조사항목

조직적합성검사프로그램은 연 2회에 걸쳐 HLA 형별검사, HLA-B27 검사, HLA 교차시험, 그리고 HLA 항체 선별(screening)과 동정(identification) 검사 총 5개 항목에 대해 시행되었다. 신선한 세포로 배송되어야 하는 특성상 24-72시간에 검체가 전달되도록 신속 예약배송시스템을 활용하였고, 실온상태에서 세포 신선도를 보증하기 위하여 외부 기온이 높지 않은 4월 첫째 주와 10월 둘째 주 월요일에 발송하였다.

2. 외부신빙도조사용 정도관리물질

검체의 제조는 자가제조물질 개발 용역연구를 맡은 삼성서울병원에서 수행하였다. 검체 제조를 위한 혈액을 확보하기 위하여 연구윤리위원회(Institutional Review Board)의 심의를 득하였으며 공지문을 통해 자원자를 모집하였다. 자원자는 혈액공여자 선별기준에 따라 적합성을 확인하였다. 자가제조된 물질은 분주 및 라벨링을 마친 후 대한임상검사정도관리협회로 즉시 운반되어 포장된 후 각 참여기관으로 당일 발송되었다. 국내 특급우편을 이용하여 혈청은 냉장, 세포는 실온상태에서 배송되었으며 발송 후 24-48시간 내에 검사실에 도착될 수 있도록 하였다. 제주도의 경우에는 항공우편을 이용하여 72시간 내에 도착될 수 있도록 하였다.

1) HLA 형별검사 및 HLA-B27형 검사용 전혈 제조

자원자들을 대상으로 미리 HLA 형별검사를 시행하여 교차시험에서도 활용할 수 있는 HLA 형과 HLA-B27 양성 검체를 확보하였다. 발송 당일 선별한 자원자들로부터 ethylenediaminetetraacetic acid 전혈을 채집한 후 시험관당 1 mL씩 즉시 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

2) HLA 교차시험용 단핵구 부유액 제조

교차시험에서 적절한 반응을 보이는 HLA 형을 가진 자원자로부터 발송 당일 혈액분반술을 통해 필요한 수의 단핵구를 채집하였다. 채집 즉시 0.5-1×107/mL의 농도가 되도록 자가혈장으로 희석한 후 시험관당 1 mL씩 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

3) HLA 교차시험 및 항체동정용 혈청 제조

신장이식 대기 중 단일항원형 비드동정(single antigen bead identification)검사를 통해 항원 특이성이 밝혀진 환자로부터 서면동의서를 획득한 후 약 100 mL의 전혈을 채집하였다. 채집 전 담당 임상의로부터 환자 상태에 대한 자문을 구하였으며 상태에 따라 한번에 100 mL 또는 2차에 나누어 총 100 mL를 헌혈실에서 채집하였다. 약 2시간 방치하여 충분한 혈액응고가 진행된 후 3,000 rpm에서 15분간 원심분리 후 혈청을 회수하였다. 혈청은 0.2 mm 필터를 사용하여 처리 후 –70°C에 냉동보관하였다. 발송 당일 해동하여 다시 한번 원심분리 후 상층액을 시험관당 약 500 L씩 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

3. 결과 판정 및 분석

결과는 차세대신빙도사업 홈페이지에 입력하도록 하였고, 입력기간은 발송 후 2주에 종료하였다. 이후 입력결과에 대한 데이터 오류를 검증한 후 통계분석을 시행하였다. 모든 항목은 정성검사에 준하여 판정하였으며 기대결과(intended response)는 신뢰할 만한 정답이 있는 경우와 그렇지 않은 경우에는 보고한 기관에서 80% 이상의 일치를 보이는 결과로 하였다. 단, HLA 교차시험의 경우 민감도가 다른 두 가지 이상의 검사법을 반드시 시행하도록 권고하고 있는 바 민감도가 높은 검사에서 80% 이상의 일치를 보이지 않는 경우 하위검사의 결과는 Code 505로 기술하고 판정 제외하였다. HLA 교차시험의 반정량 결과와 HLA 항체 항원성 동정 결과는 별도로 판정하지 않았다.

1.신빙도조사사업 참여기관 현황

각 항목별로 2018년도 신빙도조사에 참여한 기관 수 및 회신율은 1차에서는 100%의 회신율을 보였으나 2차에서는 HLA 교차시험에서 T세포와 B세포 각각 1기관과 4기관 그리고 HLA 항체 선별검사에서 1기관이 회신하지 않아 98%, 88% 그리고 95%의 회신율을 보였으며 그 외 항목에서는 100%였다(Table 1).

Table 1 . Participating laboratories and response rates of the histocompatibility program.

 Test items1st2nd
HLA typing
 Low resolution100 (37/37)100 (37/37)
 Low and high resolution100 (65/65)100 (67/67)
HLA crossmatching
 T cell100 (48/48)98 (47/48)
 B cell100 (31/31)88 (29/33)
HLA antibody
 Screening100 (20/20)95 (19/20)
 Identification100 (22/22)100 (22/22)
HLA-B27 typing100 (56/56)100 (60/60)

Values are presented as % (number of participating laboratories)..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..


2. 조직적합성 형별검사

참여한 모든 기관이 DNA 형별검사에 기반한 결과를 보고하였다. 저해상도 형별검사의 경우 sequence specific oligonucleotide probe reverse (rSSOP)와 sequence specific primers (SSP)가 가장 널리 사용되는 방법이었다. 고해상도 형별검사의 경우에는 sequence-based typing이 대다수를 차지하였으나 3기관은 그 외 방법을 사용하는 것으로 보고하였고 한 기관은 rSSOP법으로 고해상도검사를 시행한 것으로 보고하였다(Table 2). 2018년도 발송된 총 4개의 물질에 대한 class I과 class II에 대한 보고 결과는 Table 3Table 4와 같다. HLA-A와 HLA-B에 대한 저해상도와 고해상도 결과에 대한 정답률은 모두 100% (264/264, 114/114)였다. 그러나 HLA-C에 대한 정답률은 저해상도 결과에서는 100% (162/162)였으나 고해상도 결과에 대해서는 98% (108/110)를 보였는데, 형별 결과는 기대결과에 부합하였으나 표기법상 유전자좌를 혈청형과 같은 Cw로 표기하여 잘못된 용어표기법(nomenclature)으로 보고를 하였다. 특히 HLA-C의 경우 혈청형이 기대결과에 어긋나는 경우가 10건(6%, 10/166) 있었는데 잘못된 혈청형을 보고한 기관은 1기관(0.6%)이었으며 나머지 9기관(5.4%)의 경우에는 broad specificity를 보고한 경우였다. 이는 일부 SSP 시약에서 Cw9와 Cw10을 구분하지 못하는 경우가 있어 이에 해당될 것으로 생각되었다(Table 3).

Table 2 . Methods of HLA typing for different loci.

 Resolution/methods/manufacturers1st2nd


HLA-A, -B, -DRB1HLA-CHLA-DQHLA-A, -B, -DRB1HLA-CHLA-DQ
Low resolution generic type653929674234
 Sequence-based typing1313814149
  Biowithus Inc.773884
  GenDx554554
  One Lambda111111
 Sequence-specific oligonucleotide probe reverse261316291518
  Fujirebio Inc.752972
  Immucor Lifecodes125912510
  One Lambda735836
 Sequence-specific primers21931994
  Biosewoom1142932
  One Lambda10511062
 Other methods542543
  Biosewoom112221
  Biowithus Inc.11---1
  Others32-321
High resolution allelic type282714292816
 Sequence-based typing242411252512
  Biowithus Inc.1414515156
  GenDx885885
  One Lambda221221
 Sequence-specific oligonucleotide probe reverse1--1-1
  Fujirebio Inc.1--1--
  Immucor Lifecodes----1
 Other methods333333
  Biosewoom221221
  Biowithus Inc.112--1
  Others---111

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

The instruments were from the following companies: Biowithus Inc. (Seoul, Korea); GenDx (Utrecht, The Netherlands); One Lambda (Canoga Park, CA, USA); Fujirebio Inc. (Tokyo, Japan); Immucor Lifecodes (Stamford, CT, USA); and Biosewoom (Seoul, Korea)..


Table 3 . Results of human leukocyte antigen class I typing.

TrialSpecimen Type ANo. of labs BNo. of labs CNo. of labs
1stIHL-18-01Generic typeA*11/A*2465B*40/B*4049C*03/C*0326
B*40/blank16C*03/blank13
Allelic typeA*11:01/A*24:0222B*40:01/B*40:0622C*03:03/C*03:0417
A*11:01:01G/A*24:02:01G3B*40:01:01G/B*40:06:01G3C*03:03:01G/C*03:04:01:01G3
A*11:01G/A*24:02G3B*40:01G/B*40:06G3C*03:03G/C*03:041
C*03:03G/C*03:04G3
C*03:04/C*03:032
Cw*03:03/Cw*03:041
Serological equivalentA11/A2463B60/B6164Cw3/Blank2
Cw3/Cw31
Cw3/Cw91
Cw9/Cw1036
IHL-18-02Generic typeA*02/A*1165B*35/B*5165C*03/C*1439
Allelic typeA*02:01/A*11:0122B*35:01/B*51:0121C*03:03/C*14:0219
A*02:01:01G/A*11:01:01G3B*35:01:01G/B*51:01:01G3C*03:03:01G/C*14:02:01G3
A*02:01G/A*11:01G3B*35:01G/B*51:011C*03:03G/C*14:021
B*35:01G/B*51:01G3C*03:03G/C*14:02G3
Cw*03:03/Cw*14:021
Serological equivalentA2/A1163B35/B5164Cw1/Cw91
Cw3/blank1
Cw3/Cw141
Cw3/other1
Cw9/blank18
Cw9/Cw147
Cw9/other11
2ndIHL-18-03Generic typeA*01/A*0267B*37/B*5167C*06/C*1442
Allelic typeA*01:01/A*02:0623B*37:01/B*51:0123C*06:02/C*14:0221
A*01:01G/A*02:06G6B*37:01G/B*51:01G6C*06:02G/C*14:021
C*06:02G/C*14:02G6
Serological equivalentA1/A266B37/B5166Cw6/blank22
Cw6/Cw148
Cw6/other13
IHL-18-04Generic typeA*02/A*2467B*13/B*5967C*01/C*0342
Allelic typeA*02:01/A*24:0223B*13:01/B*59:0123C*01:02/C*03:0422
A*02:01G/A*24:02G6B*13:01G/B*59:01G6C*01:02G/C*03:04G6
Serological equivalentA2/A2466B13/B5966Cw1/Cw1041
Cw1/Cw32

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..


Table 4 . Results of human leukocyte antigen class II typing.

 TrialSpecimen Type DRNo. of labs (%) DQNo. of labs (%)
1stIHL-18-01Generic typeDRB1*04/DRB1*0865DQB1*03/DQB1*0628
DQB1*01/DQB1*031
Allelic typeDRB1*04:03/DRB1*08:0321DQB1*03:02/DQB1*06:0110
DRB1*04:03:01G/DRB1*08:03:02G3DQB1*03:02G/DQB1*06:01G2
DRB1*04:03G/DRB1*08:03G3DQB1*06:01/DQB1*03:021
DR*04:03/DR*08:031DQ*03:02/DQ*06:011
Serological equivalentDR4/DR863DQ6/DQ830
IHL-18-02Generic typeDRB1*11/DRB1*1265DQB1*03/blank16
DQB1*03/DQB1*0313
Allelic typeDRB1*11:01/DRB1*12:0115DQB1*03:01/DQB1*99:997
DRB1*11:01G/DRB1*12:01G4DQB1*03:01/DQB1*03:013
DRB1*11:01/DRB1*12:01G3DQB1*03:01G/DQB1*99:992
DRB1*11:01:01G/DRB1*12:01:01G3DQB1*03:01/-1
DRB1*11:01/DRB1*12:01/101DQ*03:01/-1
DRB1*11:01/DRB1*12:01:01G1
DR*11:01/DR*12:011
Serological equivalentDR11/DR1263DQ7/blank17
DQ7/DQ713
2ndIHL-18-03Generic typeDRB1*09/DRB1*1067DQB1*03/DQB1*0528
DQB1*05/DQB1*036
Allelic typeDRB1*09:01/DRB1*10:0124DQB1*03:03/DQB1*05:0110
DRB1*09:01G/DRB1*10:01G5DQB1*05:01/DQB1*03:035
DQB1*03:03G/DQB1*05:01G1
Serological equivalentDR9/DR1066DQ9/DQ526
DQ5/DQ99
IHL-18-04Generic typeDRB1*04/DRB1*1267DQB1*03/DQB1*0428
DQB1*04/DQB1*036
Allelic typeDRB1*04:05/DRB1*12:0119DQB1*03:01/DQB1*04:0110
DRB1*04:05G/DRB1*12:01G6DQB1*04:01/DQB1*03:015
DRB1*04:05/DRB1*12:01G4DQB1*03:01G/DQB1*04:01G1
Serological equivalentDR4/DR1266DQ7/DQ427
DQ4/DQ78

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..


HLA-DR에 대한 저해상도와 고해상도 결과에 대한 정답률은 각각 100% (264/264)와 99% (113/114)이었다. 한 기관에서 고해상 DR형을 표기 시 DRB1*11:01/DRB1*12:01이 아닌 DR*11:01/DR*12:01로 잘못된 용어표기법으로 보고를 하였다. HLA-DQ에 대한 저해상도와 고해상도 결과에 대한 정답률은 각각 99% (125/126)와 98% (59/60)이었다. 저해상도에서 한 기관이 DQB1*06DQB1*01로 보고하였으며, 고해상도에서는 한 기관이 DQB1*03:01/-가 아닌 DQ*03:01/-로 잘못된 용어표기법으로 보고를 하였다(Table 4).

3. 특수조직적합성 형별검사

강직성 척수염(ankylosing spondylitis)과 관련성이 있는 HLA-B27형 검사는 1차에는 56기관, 2차에는 60기관이 참여하였다. 각 회차당 1개의 양성 물질과 1개의 음성물질을 배송하였다. 혈청형 및 저해상도 수준의 결과로 판정하고 있어 유세포분석법(flow cytometry, FCM)과 같은 세포면역학적 방법과 polymerase chain reaction (PCR)을 기반으로 한 분자유전학적 방법이 사용되고 있었다(Table 5). 대다수 상품화된 시약을 사용하고 있었으나 자체 개발한 분자유전학적 검사법으로 시행하고 있는 기관도 1차에서는 2기관, 2차에서는 3기관 있었다. 정답률은 1차에서 98%로 PCR법으로 검사한 1기관이 음성결과를 양성으로 보고하였으나, 2차에서는 100%였다.

Table 5 . Methods and results of HLA-B27 typing.

 Methods/manufacturers1st2nd


IB27-18-01IB27-18-02IB27-18-03IB27-18-04



PresentAbsentPresentAbsentPresentAbsent
Flow cytometry2222
 Becton Dickinson HLA-B27 kit1122
 Beckman Coulter Inc.11
Molecular1515115555
 BioCore HLA-B*27 PCR kit8888
 Bioneer AccuPower HLA-B27 Real-Time PCR kit5555
 Biosewoom HLA-B*27 PCR kit16161717
 Biosewoom Real-Q HLA-B*27 Detection kit11111111
 Biowithus HuGen HLA-B*27 PCR177188
 Infopia GeneFinder HLA-B*27 RealAmp kit2233
 Laboratory developed test2233
Other methods2233
 Others2233
 Total1555516060

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; PCR, polymerase chain reaction..


4. 조직적합성 교차시험검사

각 회차당 2개의 혈청과 2개의 단핵구부유액을 배송하여 4쌍씩의 교차시험을 시행하도록 하였으며 총 8쌍의 결과를 얻었다. 1차에는 T세포 교차시험에는 총 48기관이, B세포 교차시험에는 총 31기관이 참여하였다. T세포 교차시험의 경우 민감도가 다른 두 가지 이상의 검사법을 반드시 시행하도록 권고하고 있다. 전체적으로 29기관이 T세포-보체매개세포독성법(T cell-complement dependent cytotoxicity)-Direct법(T-CDC-Direct법), T-CDC-anti-human globulin법(T-CDC-AHG법)과 T-flow cytometry법(T-FCM법)을 모두 시행하였고, 14기관이 T-CDC-Direct법과 T-CDC-AHG법을 시행 보고하였다. 각각 2기관씩은 T-CDC-Direct법과 T-FCM법을 그리고 T-CDC-AHG법과 T-FCM법을 시행하였으며, 1기관은 T-FCM법 결과만을 보고하였다. B세포 교차시험의 경우 11기관에서 B-CDC-Direct법과 B-FCM법 결과를 모두, 8기관에서는 B-CDC-Direct법 결과만을 그리고 12기관에서는 B-FCM법 결과만을 보고하였다. 2차에는 T세포 교차시험에는 총 48기관이, B세포 교차시험에는 총 33기관이 참여하였다. 전체적으로 30기관이 T-CDC-Direct법, T-CDC-AHG법과 T-FCM법을 모두 시행하였고, 14기관이 T-CDC-Direct법과 T-CDC-AHG법을 시행 보고하였다. 두 기관은 T-CDC-AHG법과 T-FCM법을 시행하였고 각각 1기관씩은 T-CDC-Direct법과 T-FCM법 결과만을 보고하였다. B세포 교차시험의 경우 10기관에서 B-CDC-Direct법과 B-FCM법을, 7기관에서는 B-CDC-Direct법을, 그리고 12기관에서는 B-FCM법 결과만을 보고하였다. 그러나 T세포에서 1기관과 B세포에서 4기관이 결과를 입력하지 않았다. 각 세포와 검사법에 따른 결과를 Table 6에 정리하였는데, 정성결과에 따라 결과 판정을 시행하였으며, 반정량 희석배수 결과는 기관 간의 결과 분포를 파악하기 위하여 함께 표기하였다. IX-18-01+IX-18-03 T-CDC법과 IX-18-05+IX-18-07 T-CDC와 B-CDC법 결과는 각각 더 민감한 검사인 T-FCM과 B-FCM법 결과에서 80% consensus에 도달하지 못하여 Code 505를 적용하여 판정 제외하였고, 그 외는 각 검사법 내에서 80% consensus에 도달하지 못하여 판정 제외하였다. 각 교차시험 검체에서 부적합 결과의 비율은 Code 505에 해당하는 결과들을 제외하고 도출하였는데, 1차 T세포 교차시험에서는 0%-7.3% (평균, 2.7%; 10/372), B세포 교차시험에서는 0%-17.4% (평균, 5.4%; 7/130)이었으며, 2차 T세포 교차시험에서는 0%-4.8% (평균, 3.6%; 12/330), B세포 교차시험에서는 0%-17.5% (평균, 6.6%; 8/120)이었다.

Table 6 . Methods and results of human leukocyte antigen crossmatching.

TrialSpecimen MethodsTotalNegativePositive1:11:21:41:81:161:32>1:32 Intended response
1stIX-18-01+IX-18-03T-CDC-Direct45450Code 505
T-CDC-AHG453872311Code 505
T-FCM342311Code 505
B-CDC-Direct1912722111Code 505
B-FCM23419Positive
IX-18-01+IX-18-04T-CDC-Direct4542312Negative
T-CDC-AHG4541413Negative
T-FCM34322Negative
B-CDC-Direct192171493Positive
B-FCM23023Positive
IX-18-02+IX-18-03T-CDC-Direct4504532112252Positive
T-CDC-AHG450452272311Positive
T-FCM34034Positive
B-CDC-Direct190192134Positive
B-FCM23023Positive
IX-18-02+IX-18-04T-CDC-Direct45450Negative
T-CDC-AHG45450Negative
T-FCM34331Negative
B-CDC-Direct1911813211Code 505
B-FCM23122Positive
2ndIX-18-05+IX-18-07T-CDC-Direct45450Code 505
T-CDC-AHG464511Code 505
T-FCM34277Code 505
B-CDC-Direct18117313Code 505
B-FCM22616Code 505
IX-18-05+IX-18-08T-CDC-Direct4554038825113Positive
T-CDC-AHG4614534471512Positive
T-FCM34034Positive
B-CDC-Direct18018121104Positive
B-FCM22022Positive
IX-18-06 +IX-18-07T-CDC-Direct4531147421Code 505
T-CDC-AHG46442611106351Positive
T-FCM34034Positive
B-CDC-Direct18414234113Positive
B-FCM22319Positive
IX-18-06+IX-18-08T-CDC-Direct454411Negative
T-CDC-AHG464511Negative
T-FCM34340Negative
B-CDC-Direct181711Negative
B-FCM22211Negative

Abbreviations: T-CDC, T cell-complement dependent cytotoxicity; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry; B-CDC, B cellcomplement dependent cytotoxicity..


5. 조직적합성 항체검사

각 회차당 2개의 혈청을 배송하여 총 4개의 물질에 대한 결과를 얻었다. 조직적합성 항체검사는 선별과 동정 모두 Immucor Lifecodes사(Stamford, CT, USA)와 One Lambda사(Canoga Park, CA, USA)의 luminex microbead array 기반의 시약을 사용하여 이루어지고 있었다.

선별검사의 경우 1차에 20기관과 2차에 19기관이 회신하였는데, 모두 적합한 결과를 보고하였다(Table 7). 동정검사의 경우에는 여러 개의 항원이 한 비드에 부착되어 있는 시약을 이용한 표현형(phenotyping) 검사와 한 개의 항원이 한 비드에 부착되어 있는 시약을 이용한 단일항원형 동정(single antigen identification) 검사결과를 1차에서는 각각 12개와 22개의 기관에서(Tables 8, 9), 2차에서는 각각 11개와 22개의 기관에서(Tables 10, 11) 보고하였다. 항원 동정검사에 대해서는 정성결과로 평가하였고, %PRA (percent reactive antibody)와 동정항원성에 대해서는 평가하지 않았다. 부적합 판정을 받은 기관은 없었으나 동일한 시약을 사용하는 기관들 내에서도 보고한 항원성 및 항원의 수는 다양하였으며, %PRA의 보고범위도 매우 넓었다. 예를 들어 IHA-18-02 class I의 경우 4%-95%PRA의 분포를 보였는데, 그 안에서 동일한 항원성을 보고하면서도 %PRA는 다른 기관들이 존재하였다.

Table 7 . Kits and results of human leukocyte antigen antibody screening.

Manufacturers/kits1st2ndIntended response


IB27-18-01IB27-18-02IB27-18-03IB27-18-04




PresentPresentPresentPresent
One Lambda LABScreen Mixed11111111Present
Lifecodes LifeScreen Deluxe9988Present
Total20201919

The kis were from the following companies: One Lambda (Canoga Park, CA, USA) and Immucor Lifecodes (Stamford, CT, USA)..


조직적합성검사 신빙도조사는 대한임상점사정도관리협회에서는 2018년도에 처음으로 도입, 시행되었다. 기존 대한진단검사의학회에서 시행해 왔던 신빙도조사의 범위 및 입력방식을 대한임상검사정도관리협회의 차세대전산시스템에 반영하였다. 그러나 결과 분석방법 및 방향 그리고 보고서 양식에 있어서는 차세대전산시스템이 가진 정형화된 방식으로 인하여 그간 시행해 왔던 방식과는 상당한 차이가 있었고, 이로 인해 참여기관에서 보고서를 통해 자체 및 참여기관들의 결과를 파악하고 해석하는 데 어려움이 있었다.

조직적합성검사 프로그램 참여 및 회신기관은 1차와 2차가 동일하지는 않았다. 2차에서 HLA 형별검사 중 고해상도 결과 보고기관이 2군데 늘어났으며, HLA-B27형 검사는 4군데 늘어났다. B세포 교차시험의 경우에도 보고기관이 2기관 증가하였으나 4기관에서 not available (NA)로 입력하여 실제 분석결과 수는 2차에서 감소하였다.

HLA 형을 기술하는 방식은 2010년 개정된 World Health Organization (WHO) nomenclature 표기법에 따른다[3]. Lee와 Park [4]은 한국인의 HLA 대립유전자를 중심으로 새 명명법을 쉽게 적용할 수 있도록 이를 간추려 보고한 바 있다. HLA 형별검사 결과 중 잘못된 형을 보고한 경우는 단 한 건이었으며 오히려 표기법의 오류가 4건 있었다. 고해상도 결과 중 HLA-C 대립유전자 표기 시 대문자 C만을 사용하는 대신 혈청형과 같은 Cw로 표기한 경우가 2건, HLA-DR 대립유전자 표기 시 표적 유전자부위인 beta-chain을 표기하는 DRB1 대신 혈청형과 같은 DR로 표기한 경우가 2건 있었다. HLA-C 혈청형의 경우 다수의 기관에서 C*03:04C*03:03를 Cw9와 Cw10으로 구분하지 않고 broad specificity인 Cw3으로 보고하였다. 이는 일부 PCR-SSP 시약에서 이 두 혈청형을 구분할 수 없어서인 것으로 생각되며, 혈청형과 저해상도 유전자형 결과가 널리 이용되고 있는 장기이식분야에서는 HLA-C의 임상적 중요성이 낮아 이를 구분하여 보고하지 못하는 것이 검사실의 수행능력에 미치는 영향은 미미할 것으로 생각된다. IHL-18-02와 IHL-18-03은 C*14:02를 가진 검체인데, HLA Dictionary 2008 (https://www.ebi.ac.uk/cgi-bin/ipd/imgt/hla/get_dictionary.cgi)에 따르면 WHO에서 정한 혈청형(WHO assigned type)이 결정되어 있지 않으며 전문가들이 정한 혈청형(expert assigned type)은 Cw1 또는 blank로 제안되고 있다. 입력 시 정해진 혈청형이 없는 경우 other로 표기하도록 하였는데, 대다수의 기관은 other 또는 blank로 보고하였으나 일부는 Cw14로 보고하였으며 1기관만이 Cw1로 보고하였다.

Table 8 . Methods and results of human leukocyte antigen class I and II antibody identification of IHA-18-01.

Tests/manufacturersIHA-18-01

%PRASpecificity
Class I phenotyping (n=12)
 One Lambda LABScreen PRA class I (n=5)89A2/A68/A69/B18/B35/B37/B46/B49/B50/B51/other
80A2/A68/B35/A34/A33/A26/B55/Cw8/A80/B51/B71/B52/Cw9/B72/Cw12/B18/Cw2/B50/B67/B78/B54/B65/B57/B53/B75/B62/B58/B39/B63/B38/B64/B56/B49/A69
80A2/B35/B58/A68/B51/B63/B57/B52/B72/B78/A34/A33/B18/B75/B38/B67/B71/B53/B62/A69/B49/B50/B39
80A2/B58/B72/B35/B78/A68/B57/B75/B71/B51/B53/other
78Other
 Immucor Lifecodes class I ID (n=7)100A2/B53/B35/B78/B75/B71/B77/B57/B51/B58/B49/B50/B62/B63
100Other
100B75/B62/B35/A2/B49/B78/B71/B63/B53/B56/B50/B57/A68/A3/A69/B72/B51/B55/B58/B52/B77
98Cw6/Cw10/A1/Cw8/A30/B39/A34/Cw16
94A2/A3/A30/A33/A68/B52/Cw1/Cw6/Cw15/Cw8/Cw16
92A2/B35/A69/B78/B51/A68/B53
80A2/A3/A30/A68/B13/B35/B52/B54/B56/B57/B58/B60/Cw15
Class I single antigen (n=22)
 One Lambda LABScreen single antigen class I (n=12)100A2/B51/B35/B78/B53/B71/B75/A69/B58/A68/B57/B49/B52/B77/B72/B18/B50/B62/B63/B56/B46/B37/B64/B8/B65/Cw9/B48/B76/Cw10/B5CREG (Rodey)/B8CREG (Rodey)
100B58/B71/B78/B51/B57/B75/B53/B52/B49/B72/B35/A2/B62/A68/B50/B18/B77/A69/B63/B56/B46/B37/B64/B65/B8/Cw9/B76/Cw10/B48/B54/B59/B38/B39/B45/A36/B44/A29/A74/A31/A11/A33/Cw15/Cw4/Cw6/Cw16/Cw8
100A2/A3/A11/A29/A31/A33/A36/A68/A69/A74/B8/B18/B35/B37/B38/B39/B44/B45/B46/B48/B49/B50/B51/B52/B53/B54/B56/B57/B58/B59/B62/B63/B64/B65/B71/B72/B75/B76/B78/B77/Cw2/Cw4/Cw6/Cw9/Cw10/Cw14/Cw15/Cw16/other
100A2/A3/A11/A29/A30/A31/A33/A36/A68/A69/A74/B8/B18/B35/B37/B38/B39/B44/B45/B46/B48/B49/B50/B51/B52/B53/B54/B56/B57/B58/B59/B62/B63/B64/B65/B71/B75/B76/B77/B78/Cw4/Cw9/Cw10/Cw15
100A2/A3/A11/A29/A30/A31/A33/A36/A68/A69/A74/Cw4/Cw9/Cw10/B8/B18/B35/B37/B38/B39/B44/B45/B46/B48/B49/B50/B51/B52/B53/B54/B56/B57/B58/B59/B62/B63/B64/B65/B71/B72/B75/B76/B77/B78
100A2/A68/B57/B51/A33/A29/B44/A11/Cw10/B75/Cw4/B46/B60/B49/B38/A74/B76/B41/B54/Cw16/B8/A69/B48/B35/B62/B53/Cw12/Cw7/B77/Cw6/B37/Cw9/B18/A3/B65/B56/A36/A43/B59/Cw2/B52/B39/B64/Cw14/B78/B58/Cw5/Cw8/B72/B63/A32/B73/B71/A31/Cw15/B45/Cw1/B50/B13/A66/A34/A30/A2403
100Cw10/B76/B65/Cw9/B8/B64/A2/B37/B35/A68/B46/B51/A69/B78/B53/B71/B75/B72/B62/B77/B56/B18/B63/B50/B52/B57/B49/B58/Cw15/A30/B44/A31/A11/B45/A33/A74/A29/A36/B39/B59/B38/B48/B54/B27/B47/A80/A24/A66/B61/B41/B60/A32/Cw5/B73/A34/Cw12/Cw7/Cw8/Cw14/Cw2/Cw16/Cw6/B13/Cw4/other
100A2/A68/A69/B18/B35/B37/B46/B49/B50/B51/B52/B53/B56/B57/B58/B62/B63/B71/B72/B75/B77/B78/B8/B38/B39/B45/B48/B54/B59/B64/B65/A3/A11/A29/A31/A33/A36/A74/B44/Cw4/Cw6/Cw8/Cw15/Cw16/Cw9/Cw10/B76
82A2/A34/B51/A29/B44/A66/Cw10/B57/B75/A33/A11/A68/Cw1/B77/B62/Cw14/A1/B45/Cw7/Cw8/A74/Cw4/Cw5/B38/A43/B39/B56/B41/A69/A32/B71/B72/Cw16/B53/B54/B73/B18/Cw12/A36/Cw15/Cw6/B37/B48/B49/B50/B78/B52/Cw9/Cw2/B35/B60/B63/B64/B65/A3/B8/B46/A31/B58/B59/B61/B76/B13/A30/A24
59A2/B51/B78/B35/B71/B49/B50/B72/B53/B57/B62/A68/B52/B58/B56/B18/B75/B63/B77/B37/B64/A69/B65/B46/B8/B76/Cw9/B59/B54/Cw10/B48/A36/B39/A3/A11/A29/B45/A33/B38/Cw4/A74/A31/B44/Cw8/Cw7/Cw6
58B49/B57/B50/B63/B56/B18/B58/B52/B62/A69/B77/B72/B46/B75/B71/A68/B53/B37/B78/B64/B8/B51/B35/B65/B76/Cw9/A2/Cw10/B48/B54/B59/B38/B39/A36/A29/A3/A11/A74/A33/B45/A31/B44/A30/Cw4/Cw15/Cw8
31A2/B51/B35/B75/B78/B53/B49/B71/B57/B50/B58/B56/A68/B72/B77/B52/B62/B63/A69/B18/B64/B65/B37/B8
 Immucor Lifecodes LSA class I (n=10)99A2/A3/A11/A29/A33/A36/A43/A68/A69/B8/B18/B35/B37/B38/3901/B46/B49/B50/B51/B52/B53/B54/B56/B57/B58/B59/B62/B63/B64/B65/B71/B72/B75/B76/B77/B78/Cw9/Cw10
98A2/A11/A203/A29/A3/A33/A36/A43/A68/A69/B18/B35/B37/B38/3901/B45/B46/B49/B50/B51/B52/B53/B54/B56/B57/B58/B59/B62/B63/B64/B65/B71/B72/B75/B76/B77/B78/B8/other
97A2/B35/B57/B71/B75/B49/B50/B58/B62/B51/B56/B72/A68/B52/A69/B18/B46/B37/B64/A11/A33/B54/B8/B76/B65/B59/A3/B38/A29
96A2/A68/A69/B62/B75/B77/B63/B71/B35/B49/B50/B51/B53/B56/B57/B78
82A2/A203/B53/B35/B78/B75/B71/B51/B49/B57/B50/B77/B62/B63/B58/B52/B72/B56/A68/A69
50A2/B35/B71/B75/A68/B57/B51/A69/B62/B49/B72/B50/B52/B58/B56/B18/A11/B46/B37/A3/B64/B65/B54/B8/A29/B15/B38/B59/A32/A2403/A33/3901/Cw10/other
50A2/A203/B35/B49/B57/B71/B51/B75/B53/B63/B78/B77/B72/B50/B58/B52/B56/B62/A68/A69/B18/B37/B46/B64/A11/B54/A33/B76/B65/B8/B59/A36/Cw10/Cw9/B38/3901/A43/A29/A32/A74
47A2/A11/A68/A69/A203/B18/B35/B37/B46/B49/B50/B51/B52/B56/B57/B58/B62/B63/B71/B72/B77/B78/B54/B64/B65
46A2/A203/B35/B53/B78/B57/B75/B77/B71/B50/B51/B52/B49/B62/B58/B63/B72/B56/A69/A68/B18/B46/B37/B64/A33/A11/B8/B54/B65/B59/B76/Cw10/Cw9/A36/B38/3901/A29/A43
43A2/B53/B35/A203/B78/B71/B57/B51/B77/B75/B49/B50/B58/B63/B72/B62/B52/B56/A68/A69/B18/B37/B46/B64/A33/A11/A36/B38/A29/A43
Class II phenotyping (n=12)
 One Lambda LABScreen PRA class II (n=5)97DR14/DR52/DQ4/DQ5/DQ6/DQ7/other
97DQ5/DQ7/DQ6/DQ2/DQ9/DR12/DR18/DR11/DR16/DR52/DR14/DR15/DR1/DR51/DR17/DR13/DR53/DR103
97DR13/DR17/DR11/DR12/DR14/DR18/DQ7/DQ5/DQ6
94Other
91DR7/DR15/DQ9/DR53/DR51/DR12/DR9/DQ2/DQ8/DR52/DQ4/DR4/DR8/DR16/DR1/DQ5/DR14/DR13/DR17/DR11
 Immucor Lifecodes class II ID (n=7)100DR52/DR51/DR1/DQ9/DQ2/DQ7/DQ6/DQ5/DQ4/DR4/DR8
100DR52/DR1/DR4/DR8/DQ2/DQ4/DQ5/DQ7/DQ9
100DR17/DR12/DR14/DR11/DR13/DR18
100DR14/DR17/DR11/DR12/DQ5/DR1/DR13/DQ2/DQ6/DQ7/DR16/DQ4/DR18/DR15
97Other
96DQ4/DQ2/DQ7/DQ5/DQ6
0Absent
Class II single antigen (n=22)
 One Lambda LABScreen single antigen class II (n=12)100DQ5/DQ6/DQ7/DR14/DR52/DR17/DR18/DR13/DR4/DR11
99DR14/DR52/DQ4/DQ5/DQ6/DQ7/DQ2/DR3/DR17/DR18/DR4/DR13/DR8/DR11/DR15/DR16
99DQ7/DR52/DR14/DQ6/DQ4/DQ5/DR4/DR13/DR18/DR17/DQ2/DR15/DR8/DR16/DR11/other
98DQ6/DQ4/DR14/DR15/DQ2/DR4/DQ5/DR16/DR11/DR13/DR1/DR52/DR17/DR18/DR8/DQ7/DR9
97DR14/DR52/DQ4/DQ5/DQ6/DQ7/DR1/DR4/DR13/DR17/DR18/DR11/DR15/DR16
97DQ5/DQ4/DQ6/DQ7/DR14/DR52/DR17/DR13/DR18/DR11/DR4/DR8/DR15/DR16
97DR1/DQ5/DQ4/DQ6/DQ7/DR52/DR14/DR17/DR18/DR13/DR4/DR11/DR8
97DR1/DR4/DR11/DR13/DR14/DR17/DR18/DR52/DQ4/DQ5/DQ6/DQ7/other
56DQ6/DQ7/DQ4/DR14/DR15/DQ2/DR4/DR13/DR16/DR1/DR9/DQ5/DR11/DR8/DR10/DR18/DR17/DR52
42DQ5/DQ6/DQ7/DQ4/DR52/DR14/DR17/DR1/DR18/DR4/DR13/DR11/DR8/DR15/DR16/other
39DQ4/DR14/DR52/DQ6/DQ5/DR17/DR13/DR18/DR1/DR4/DR11/DR8/DR15/DR16
28DQ4/DQ7/DQ6/DQ5/DR52/DR14/DR17/DR1/DR13/DR18/DR4/DR11
 Immucor Lifecodes LSA class II (n=10)97DR1/DR11/DR13/DR14/DR1403/DR1404/DR17/DR18/DR52/DR4/DQ4/DQ5/DQ6/DQ7/other
97DQ5/DQ6/DQ4/DR14/DQ7/DR17/DR18/DR13/DR4/DR1/DR11
97DR1/DR4/DR8/DR11/DR13/DR1404/DR1403/DR15/DR16/DR17/DR18/DR52/DQ4/DQ5/DQ6/DQ7
91DQ4/DQ5/DQ6/DQ7
83DR1/DR52/DR14/DQ5/DQ6/DR17/DR18/DR4/DR13/DQ4/DQ7/DR11/DR8/DR16
47DQ5/DQ7/DQ4/DQ6/DR1404/DR17/DR4/DR13/DR1403/DR11/other
47DR52/DR14/DR1404/DR17/DR18/DR4/DR13/DR11/DR1403/DQ2/DQ5/DQ6/DQ4/DQ9/DQ7
47DQ2/DQ6/DQ5/DQ9/DR52/DQ4/DR14/DQ7/DR1404/DR17/DR18/DR4/DR13/DR1403/DR11
47DR52/DR14/DR1404/DQ5/DQ6/DQ2/DQ9/DQ4/DQ7/DR17/DR18/DR13/DR4/DR1403/DR11
46DQ2/DQ4/DQ6/DQ7/DQ9/DR14/DR52/DR4/DR13/DR17/DR18/DQ5

Abbreviation: %PRA, percent reactive antibody. The kits were from the following companies: One Lambda (Canoga Park, CA, USA) and Immucor Lifecodes (Stamford, CT, USA)..


HLA-B27형 검사는 대다수의 기관은 PCR 기반의 전용 상품화 시약을 사용하고 있었으나, 2기관에서 FCM법을 사용하고 있었으며, 3기관은 자체 개발한 분자유전학적 방법을 사용하고 있었고, other method로 보고한 기관 중에는 상품화 HLA-B typing용 시약으로 검사 후 HLA-B27 유무를 판정하는 기관도 있는 것으로 파악되었다.

HLA 교차시험 시행기관들에서 변화는 T-FCM법이 T-CDC-Direct법과 T-CDC-AHG법 중 한 가지를 대체하거나 B-CDC-Direct법 대신 B-FCM법만을 시행하는 기관이 점차 증가하고 있다는 것이다. FCM법의 경우 시험 검체와 음성대조물질 간의 median fluorescence intensity (MFI) ratio를 기반으로 정성 판정을 하고 이를 반정량 결과로 표기하게 되는데, 각 기관마다 다른 cut off를 가지고 있으며 기존 CDC법에서 널리 사용되어온 희석배수 반정량 표기와 연계하여 결과를 해석하기가 어렵다. 또한 기존 대한진단검사의학회 외부정도관리 결과에서 각 기관의 MFI ratio를 분석하였을 때 매우 넓은 범위에 걸쳐 분포하고 있음을 관찰하였는데, 이는 Yu 등[5]이 2015년 대한진단검사의학회 주관 HLA 교차시험 표준화사업의 일환으로 설문조사를 통해 조사 보고한 바와 같이 기관마다 다양한 조건에서 유세포 교차시험을 시행하고 있기 때문으로 생각된다. 당시 검사기관들을 대상으로 검사법 워크숍을 시행하여 일부 개선이 이루어졌으리라 기대되나 향후 표준화된 프로토콜의 개발 및 적용과 같은 좀 더 적극적인 HLA 유세포 교차시험 표준화를 위한 노력이 필요하겠다. 결과 판정에 있어서는 민감도가 다른 두 가지 이상의 검사법을 반드시 시행하도록 권고하고 있는 바 민감도가 높은 검사에서 80% 이상의 일치를 보이지 않는 경우 하위검사의 결과는 Code 505로 기술하고 판정 제외하였다. 그러나 이는 College of American Pathologist 정도관리프로그램의 판정기준에 따라 민감도가 높은 검사(T-FCM법 또는 T-CDC-AHG법)에서 10% 이상의 양성결과를 보이는 경우 하위검사에서 80% 이상의 일치를 보이지 않더라도 양성결과는 판정 제외, 음성결과는 unacceptable로 판정하던 기존의 판정기준에 비하여 신빙도조사 결과에 대한 판별력이 떨어지므로 향후 판정기준의 개선이 이루어져야 하겠다. 교차시험 검체에서 부적합 결과의 비율은 T세포에서 1, 2차 평균 3.1% (22/702)인데 반하여 B세포에서는 6.0% (15/250)으로 높았으며, B세포 교차시험의 경우 2차에서 4기관이 NA로 입력하였다. 이는 B세포 교차시험이 상대적으로 기관 간 변이에 취약함을 시사하는데, 말초혈액 내 B세포 수가 적고 분리 시 회수율이 낮으며 나일론 울 컬럼을 사용할 경우 추가적인 조작으로 생존도가 감소할 수 있는 점 등을 고려 시 예상할 수 있는 결과이다. 그러므로 B세포 취급 및 검사시행 시 숙련도가 더 향상되도록 개선활동이 필요하겠다.

Table 9 . Methods and results of human leukocyte antigen class I and II antibody identification of IHA-18-02.

Tests/manufacturersIHA-18-02

%PRASpecificity
Class I phenotyping (n=12)
 One Lambda LABScreen PRA class I (n=5)18A31/A33/A30/other
11A31/A33
9A31/A33
9A31/A33/A30/A32
9A31/A33
 Immucor Lifecodes class I ID (n=7)44A30/A31/A32/A33/A36
42A30/A31/A33/B37/B60
42A31/A33/B37/A30
40A30/A31/A33
40A30/A31/A33/B37/B60
40A31/A33/A32/A30
28A31/A33/B65/B37
Class I single antigen (n=22)
 One Lambda LABScreen single antigen class I (n=12)95A31/A33/A30/A74/A32/A36
67A30/A33/A31/B46/A36/A32/A74/B63/Cw4/Cw5/A34/A68/A66/Cw6/B8/A29/B76/other
55A29/A33/A30/A74/B76/B8/A32/A3/A36/A31/B46/A66
49A31/A30/A33/A32/A74
49A31/A33/A30/A74/A32
49A31/A30/A33/A32/A74/other
49A30/A31/A32/A33/A36/A74/other
46A31/A33/A30/A74/A32/A36
12A31/A33/A30/A74/A32/A36/B8/B46/A29
8A31/A33/A30/A74/A32
8A31/A33/A30/A32/A74/other
7A31/A33/A30/A32/A36/A74
 Immucor Lifecodes LSA class I (n=10)49A30/A31/A32/A33/A36
49A30/A31/A32/A33
48A30/A31/A33
48A31/A33/A30
47A31/A33/A30/A32/A36/A74
7A31/A33/A30/A32/A36/A74
7A31/A33/A30/A32/B37/Cw7
6A31/A33/A30/A32/A36
6A31/A33/A30/A32/A36
4A31/A33/A30
Class II phenotyping (n=12)
 One Lambda LABScreen PRA class II (n=5)94DR8/DR12/DR51/DQ6/DQ7/DQ8/DQ9/other
94DQ7/DQ2/DQ6/DQ9/DQ8/DR12/DR8/DR11/DR51/DR15/DR52/DR13/DR7/DR53/DR16/DR9
94DR8/DR12/DQ8/DQ7/DR51/DQ9/DQ6/DR13/DR16/DR11/DR7/DR4/DR15/other
86Other
46DR8/DR12/DR11/DQ9/DQ6/DQ8/DR13/DR15/DR16
 Immucor Lifecodes Class II ID (n=7)100Other
97DR51/DR13/DR17/DR12/DQ9/DR8/DQ4/DQ6/DR10/DQ2/DR103/DR7/DQ7/DQ8
97DR8/DR7/DR9/DR52/DR51/DR103/DQ4/DQ6/DQ7/DQ8/DQ9/DQ2
97DQ8/DQ9/DR8/DQ6/DR13/DR14/DR15/DR16
97DR8/DR103/DR13/DQ9/DR12/DR16/DQ8/DQ6/DQ4/DR7/DQ7/DR11/DR14/DQ2/DR15
75DQ6/DR8/DQ8/DQ9
30DR8/DQ8/DQ9
Class II single antigen (n=22)
 One Lambda LABScreen single antigen class II (n=12)98DR8/DR12/DR51/DQ6/DQ7/DQ8/DQ9/DR103/DR4/DR7/DR11/DR13/DR16/DR15/DQ2/DQ4/DR9
98DR8/DR12/DR51/DQ7/DQ8/DQ9/DR13/DQ6/DR16/DR11/DR103/DR7/DR4/DQ2/DR15/DQ4
98DQ6/DQ7/DQ4/DQ8/DQ9/DR15/DR12/DR11/DR16/DR13/DQ2/DR103/DR7/DR8/DR9/DR51/DR4
98DQ7/DR51/DQ6/DQ9/DQ8/DR8/DR12/DQ2/DR4/DR7/DR103/DR11/DR16/DR13/DR9/DQ4/DR15/other
97DR8/DR12/DQ8/DQ9/DQ6/DR51/DQ7/DR13/DR16/DR11/DR103/DR7/DR4/DR15
97DR4/DR7/DR8/DR11/DR12/DR13/DR15/DR16/DR51/DQ6/DQ7/DQ8/DQ9/other/DR103
95DQ9/DQ6/DQ8/DR12/DQ7/DR16/DR13/DR11/DR7/DR103/DR15
92DR8/DR12/DR51/DQ6/DQ7/DQ8/DQ9/DR7/DR11/DR13/DR16/DR15
49DQ6/DQ7/DQ4/DQ9/DQ8/DR15/DQ2/DR9/DR13/DR11/DR16/DR12/DR8/DR17/DR103/DR7/DR51
39DR8/DR12/DQ8/DQ9/DQ6/DR51/DQ7/DR13/DR16/DR11/DR103/DR7/DR4/DR15
39DR8/DR12/DQ8/DQ7/DR51/DQ9/DQ6/DR13/DR16/DR11/DR7/DR4/DR15/other
34DQ6/DQ9/DQ8/DR8/DR12/DR13/DR51/DR16/DQ7/DR11/DR7/DR4
 Immucor Lifecodes LSA class II (n=10)100DR4/DR7/DR8/DR11/DR12/DR13/DR1404/DR1403/DR15/DR16/DR17/DR51/DR103/DQ6/DQ7/DQ8/DQ9
98DQ8/DQ6/DR8/DQ9/DR14/DR12/DR11/DR7/DR16/DR13/DQ7/DR4/DR1/DR15
98DR1/DR12/DR14/DR8/DR13/DR11/DR16/DR51/DQ6/DR7/DR4/DQ9/DQ8/DR15/DQ7/DR17
97DQ6/DQ7/DQ8/DQ9/DR103/DR11/DR12/DR13/DR1403/DR1404/DR15/DR16/DR4/DR51/DR7/DR8
82DR8/DR12/DQ6/DQ8/DQ9
40DQ8/DR8/DQ9/DQ6/DR12/DR1404/DR13/DR11/DR1403/DR51/DR16/DR7/DQ7/DR4/DR103/DR15
39DR8/DR1404/DR12/DQ8/DQ6/DQ9/DR11/DR1403/DR7/DR16/DR4/DR13/DQ7/DR15/other
39DR8/DR1404/DR12/DR11/DR13/DR7/DR1403/DR16/DR51/DR4/DR103/DR15/DQ8/DQ6/DQ9/DQ7
39DR8/DR12/DR1404/DQ6/DQ8/DQ9/DR11/DR13/DR16/DR1403/DQ7
39DR8/DR12/DR1404/DQ8/DQ6/DR13/DQ9/DR1403/DR11/DR16/DR7/DR51/DR4/DR103/DQ7/DR15

Abbreviation: %PRA, percent reactive antibody. The kits were from the following companies: One Lambda (Canoga Park, CA, USA) and Immucor Lifecodes (Stamford, CT, USA)..


Table 10 . Methods and results of human leukocyte antigen class I and II antibody identification of IHA-18-03.

Tests/manufacturersIHA-18-03

%PRASpecificity
Class I phenotyping (n=11)
 One Lambda LABScreen PRA class I (n=4)9B13
9B13
7B13/B27/B60
7B13/B27/B47
 Immucor Lifecodes class I ID (n=7)32B7/B13/B60/B61/B81/B47/B44
32B13/B7/B60/B61/B81/B47/B44
32B7/B13/B44/B47/B60/B61/B81
32B13/B7/B60/B61/B47/B81/Bw4/B44
32B13/B44/B61/B7/B60/B81/B47
28B13/B60/B61/B7/B47/B81
28B7/B13/B47/B60/B61/B81
Class I single antigen (n=22)
 One Lambda LABScreen single antigen class I (n=12)96B13/B81/B7/B48/B44/B61/B60/B27/B38/B47/B63/B59/B57/B49/B77/B52/B37/B51
94B13/B7/B27/B44/B48/B60/B61/B81/A24/A29/B37/B38/B46/B47/B49/B51/B52/B53/B57/B58/B59/B63/B77
94B13/B48/B7/B61/B60/B27/B38/B44/B47/B59/A24/B63/B57/B49/B58/B37/B52/B51/B46
88B13/B7/B27/B44/B48/B60/B61/B81/A24/B37/B38/B47/B49/B51/B52/B57/B59/B63/B77
87A24/B61/B51/B44/B27/B57/B13/B60/B73/B48/B46/A23/B77/B37/B58/B7/B53/B49/Cw2/B47/B52/B81/B59/B63/B38/B76
83B37/A24/B13/B59/B7/B81/B44/B27/B60/B61/B38/B47/B48/B57/B63
79B13/B81/B7/B48/B61/B60/B44/B27/B38/B47/B63/B57/B37/B77/B58/B59/B49/B52
63B13/B7/B44/B81/B61/B27/B60/B38/B63/B47/B59/B49
60B13/B7/B61/B60/B44/B27/B47
29B13/B44/B7/B27/B81/A24/B61/A23/B60/B63/Cw2/B49/B37/B47/B76
21B13/B81/B7/B61/B48/B60/B44/B27/B38/B47/B63/B57/B59/B49/B77/B52
20B13/B7/B81/B44/B61/B27/B60/B48/B38/B47/B59/B63/B49/B57/A24
 Immucor Lifecodes LSA class I (n=10)88B13/B7/B27/B60/B81/B47/B61/A23/B44/B37/B63/A24/A29/B57/B38/B48/B77/B58/B73/B59
77A23/A24/A29/B7/B13/B27/B44/B47/B60/B61/703/B81/other
73B13/A23/B7/A24/B27/A29/B47/B44/B60/B81/B63/B37
45A23/B7/B13/B27/B47/B60/B61/B81
19B7CREG (Rodey)/B13
19B13B7/B81/B61/B60/B47/B27/A23/A29/B44/B48/A24/B63/B37
16B13/B7/A23/A29/B27/B40/B47/B81/A24/B44
16B13/B7/703/B81/B60/B61/B47/B27/A23/B44/A29/B37
14A23/B7/B13/B27/B47/B60/B61
11B13/B7/A23/703/B81/B60/B61/B47/A29/B27
Class II phenotyping (n=11)
 One Lambda LABScreen PRA class II (n=4)91DR12/DR18/DR17/DR7/DR9/DR11/DR13/DR8/DR14
89DR12/DR17/DR7/DR52/DR9/DR18/DR53/DR13/DR11/DR14/DR51/DQ9/DQ2
89Other
89DR12/DR7/DR17/DR18/DR9/DR13/DR11/DR14/DR52/DR53/DR51
 Immucor Lifecodes class II ID (n=7)73DR52/DQ7/DQ2/DR7/DR9/DR8/DQ4
73DQ4/DQ7/DQ2/DR7/DR9/DR8/DR11/DR12/DR13/DR14/DR17/DR18/DR52
73DQ7/DR52/DQ4/DQ2/DR12
73DR7/DR8/DR9/DR10/DR12/DR13/DR17/DR18/DQ2/DQ4/DQ7
73DQ4/DR7/DQ2/DQ7/DR12/DR18/DR14/DR17/DR13/DR8/DR11
70DR7/DR8/DR9/DR11/DR12/DR13/DR14/DR17/DR18/DR52/DQ2/DQ4/DQ7
70DQ7/DQ4/DQ2/DR18/DR17/DR12/DR14/DR13/DR9/DR7
Class II single antigen (n=22)
 One Lambda LABScreen single antigen class II (n=12)98DR12/DR52/DR7/DR8/DR9/DR17/DR18/DR11/DR13/DR14
97DR12/DR52/DR7/DR17/DR8/DR18/DR9/DR13/DR14/DR11/DQ6/DQ7/DQ2/DQ4
96DR52/DR12/DR7/DR17/DR8/DR18/DR9/DR13/DR14/DR11/other
91DR14/DR52/DR12/DR11/DR13/DR9/DQ7/DR7/DR18/DR17/DR8/DQ2/DQ4
85DQ7/DQ2/DQ4/DR12/DR52/DR7/DR8/DR17/DR9/DR14/DR13/DR11
83DR12/DR52/DQ7/DR7/DR8/DR9/DR17/DR18/DR11/DR13/DR14
82DR9/DR12/DR52/DR8/DR7/DR17/DR18/DR13/DR14/DR11/other
82DR12/DR52/DR7/DR8/DR17/DR18/DR9/DR13/DR14/DR11
82DR12/DR52/DR7/DR8/DR17/DR18/DR9/DR13/DR14/DR11/other
25DR12/DR52/DR7/DR8/DR17/DR18/DR9/DR13/DR14/DR11
25DR12/DR52/DR7/DR9/DR8/DR17/DR18/DR13/DR14/DR11
25DR12/other/DR52/DR7/DR8/DR17/DR18/DR9/DR13/DR14/DR11
 Immucor Lifecodes LSA class II (n=10)82DR7/DR8/DR9/DR11/DR12/DR13/DR14/DR17/DR18/DR52/DR1403/DR1404/other
82DR7/DR8/DR9/DR11/DR12/DR13/DR14/DR17/DR18
82DR52/DR12/DR7/DR8/DR18/DR14/DR17/DR9/DR11/DR13
82DR52/DR12/DR8/DR7/DR9/DR14/DR18/DR17/DR13/DR11
32DQ5/DQ4/DQ6/DR12/DR3/DR1/DR7/DR8/DR9/DR14/DR2/DR13/DR1403/DR11
32DQ4/DQ7/other/DR52/DR12/DR7/DR1404/DR1403/DR9/DR8/DR18/DR17/DR11/DR13
32DQ7/DQ9/DQ2/DQ4/DR12/DR52/DR7
32DQ7/DQ9/DQ4/DR52/DR12/DQ2/DR7/DR9/DR8/DR1404/DR18/DR17/DR1403/DR13/DR11
32DR7/DR8/DR9/DR11/DR12/DR13/DR14/DR17/DR18/DR52
32DQ7/DQ9/DQ4/DR12/DQ2/DR52/DR7/DR8/DR18/DR9/DR17/DR14/DR13/DR11/DR1404

Abbreviation: %PRA, percent reactive antibody. The kits were from the following companies: One Lambda (Canoga Park, CA, USA) and Immucor Lifecodes (Stamford, CT, USA)..


HLA 항체 선별 및 동정검사는 국내 모든 기관들이 luminex microbead array법으로 시행하고 있다. 국내에서 사용되고 있는 Immucor Lifecodes사와 One Lambda사의 시약들은 자체적으로 양성 판정기준을 제시하고 있으나 절대적인 기준은 없으며 판독자에 따라 CREG (cross reactive group)나 검체의 특성을 고려하여 양성 여부를 판정하게 된다. 그러므로 현 시점에서 동정된 항원성의 종류나 수를 평가하기는 어렵다. %PRA는 동정한 항원성에 따라서 결정되지만 이를 도출하기 위하여 어떤 데이터베이스를 기반으로 어떤 공식에 의하여 계산하는가에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어 IHA-18-02 class I의 경우 4%-95%PRA의 분포를 보였는데, 13개 기관에서는 46% 이상의 %PRA를 보고하였고 9개 기관에서는 12% 이하의 %PRA를 보고하였다. 또한 동일한 항원성을 보고하면서도 %PRA는 95%와 7%로, 48%와 4%로 달리 보고한 기관들이 존재하였다. 이는 한국인의 HLA 형별 자료에 기반한 %calculated PRA (cPRA)를 도출하지 않고 시약 내에 포함된 전체 비드 중 양성비드의 비율만을 계산하였을 가능성을 생각해 볼 수 있다. 그러나 그와 같은 계산방식은 특정 인구집단이 가진 HLA에 대한 감작 정도를 예측하는 PRA의 의미에 전혀 맞지 않는다. 대한진단검사의학회 면역분과에서는 2015년 한국인 자료를 이용하여 web 기반 cPRA calculator (http://cpra.inforang.com/form/form.html)를 만들었으며 이는 모든 기관에서 무료로 사용할 수 있는데, 현재로서는 이를 이용하여 %PRA를 도출하는 것이 가장 적합하다고 할 수 있다. 시약 간 항원동정의 민감도는 동정된 항원의 수 또는 %PRA를 이용하여 비교할 수 있겠다. 그러나 기관 간 판독기준 및 %PRA 보고기준의 다양함으로 인하여 현 시점에서는 어렵다. 분석에는 포함되지 않았지만 항원 표현형 검사를 시행하고 있는 기관들이 1차와 2차에 각각 12 및 11기관이 있었다. 수입시약이기는 하나 %PRA를 도출하고, native 항원을 사용하므로 재조합 항원을 사용하는 단일항원 동정검사에서의 문제를 일부 해결할 수 있다는 장점이 있으나 정확한 항원성을 동정하는 데는 한계가 있다.

2018년 처음으로 대한임상검사정도관리협회에 도입되어 시행한 조직적합성검사 신빙도조사는 검체의 준비, 발송 및 결과 입력과정은 이전의 신빙도조사와 비교하여 순조로이 진행되었으며, 각 항목에 대한 조사결과를 종합해 볼 때 대부분의 기관이 매우 놓은 신빙도를 유지하고 있음을 확인하였다. 그러나 향후 HLA 교차시험의 판정기준 및 전반적인 보고서 양식의 개선은 이루어져야 할 것으로 생각된다.

Table 11 . Methods and results of human leukocyte antigen class I and II antibody identification of IHA-18-04.

Tests/manufacturersIHA-18-04

%PRASpecificity
Class I phenotyping (n=11)
 One Lambda LABScreen PRA class I (n=4)89A1/A36/A69/A29/A66/Cw10/A30/A11/A26/Cw14/A25/A3/A24/A34/B52/Cw15/A33/A68/A74/A80/A31/Cw16/B7/B27/Cw12/B72/B56/B35
82A1/A11/A36/A29/A66/A26/A34/A25/A69/A33/A68/A74/A80
58A1/A36/A25/A29/A66/A11/A26
40A1/A66/A36/A26/A11
 Immucor Lifecodes class I ID (n=7)92Cw6/Cw4/A1/Cw8/Cw1/A68/A30/A26/A66/B57
92Cw6/Cw7/Cw4/Cw1/A30/A26/B45
90A1/A36/A26/A66/A11/A25/A30/A34/A3/A29/A68/A74
88A1/A26/A66/A11/A33/A25/A30/A3/A29/A68
84A1/A2/A3/A11/A25/A26/A29/A30/A34/A36/A66/A68/A69/A74
84A1/A36/A11/A26
58A1/A11/A26/A29/A34/A36/B8/B27/B53/B58
Class I single antigen (n=22)
 One Lambda LABScreen single antigen class I (n=12)100A1/A36/A43/A26/A11/B76/A66/A25/A80/A29/A34/A74/A3/A68/A69/A2/Cw16/A30/Cw8/A31/Cw12/Cw7/Cw5/B73/Cw6
100A1/A26/A36/A43/A66/B76/A11/A25/A29/A34/A80/A2/A3/A30/A31/A33/A68/A69/A74/B54/B61/B73/Cw1/Cw2/Cw5/Cw6/Cw7/Cw8/Cw12/Cw14/Cw15/Cw16
100A43/A26/B76/A25/A29/A80/A66/A34/A11/A74/A68/A69/A3/A31/A30/A36/Cw16/A2/Cw7/Cw8/Cw5/Cw12/B73/Cw6/B61/Cw15/A33/Cw14/Cw1
100A2/B51/A34/B61/A66/A68/A30/A33/A11/A29/Cw7/Cw14/A43/A1/Cw8/A74/Cw4/B54/A26/A69/Cw1/Cw2/A25/Cw12/A36/B67/Cw16/Cw9/B35/B73/A3/Cw15/B46/A31/A80/B81/B76/Cw10/Cw5/Cw6
96A26/A1/A29/A11/A3/A68/A31/A2/A30/A33/B61/B67/B35/5102/B54
96A1/A26/A36/A43/B76/A11/A25/A29/A34/A66/A80/A2/A3/A68/A74/B61/B73/Cw5/Cw6/Cw7/Cw8/Cw12/Cw14/Cw16
92A43/A26/B76/A25/A29/A34/A80/A66/A11/A69/A68/A36/A74/A30/Cw16/A2/A3/A1/A31/Cw8/Cw7/Cw12/B73/Cw5/Cw6
81A1/A2/A43/A26/A25/B76/A66/A80/A34/A29/A11/A36/Cw16/A68/A74/A3/A69/A30/Cw8
77A43/A26/A66/A25/B76/A80/A36/A29/A34/A11/A1/A68/Cw16/A2/A69/A74/A30
39A26/A43/A66/A1/A36/A11/A25/B76/A34/A80/A29/A3/A30/A68/A2/A74/A31/B73/A33/A69
33A26/A43/B76/A66/A25/A36/A80/A1/A29/A34/A11/A3/A74/A2/Cw16/Cw8/A68/Cw12/Cw5/A30/Cw7/Cw6/B73/A31/A69/B61
32A43/A26/B76/A25/A36/A80/A66/A1/A29/A11/A34/Cw16/A3/A74/A68/A69/Cw8/A30/Cw7/A2/B73/Cw12/Cw5/Cw6/A31
 Immucor Lifecodes LSA class I (n=10)79A1/A2/A3/A11/A25/A26/A29/A30/A34/A36/A43/A66/A68/A69/A80/B76
79B76/A43/A11/A26/A34/A66/A29/A25/A68/A30/A3/A69/A80/A2/A1/A74
79A11/A1/A36/A26/A43/B76/A34/A66/A25/A29/A68/A3/A69/A30/A80/A2
44A1/A3/A11/A25/A26/A29/A30/A68/A69/B76
23A1/B7/A1CREG (Rodey)
23A1/A36/A11/B76/A34/A43/A26/A29/A66/A68/A80/A25/A69/A30/A3/A2/A74
22B15/A1/A36/A11/A34/A43/A26/A66/A29/A68/A80/A25/A3/A30/A69/A2
22A1/A36/A11/B76/A34/A43/A66/A29/A26/A68/A80/A25/A69/A30/A3/A2
22A1/A36/A11/B76/A34/A66/A26/A29/A68/A80/A43/A25/A30/A3/A69/A2
21A1/A3/A11/A25/A26/A29/A30/A34/A36/A43/A66/A68/A69/A80/B76
Class II phenotyping (n=11)
 One Lambda LABScreen PRA class II (n=4)94DQ6/DQ5/DQ8/DQ2/DQ4/DQ9/DR17/DR18/DR14/DR16/DR12
77DR17/DR18/DR51/DR53/DQ7/DR9/DR4/DQ8/DR7/DR12/DR8/DQ4/DQ2
54DR18/DR17/DQ5/DQ6/DR51
43Other
Immucor Lifecodes class II ID (n=7)97DR51/DQ9/DR10/DQ8/DQ4/DR103/DQ2/DQ5/DQ6/DR1/DR14
97DQ2/DQ4/DQ6/DQ5/DQ9/DR1/DR10/DR103/DR15/DR16
97DR51/DQ9/DR10/DQ8/DQ2/DQ4/DR103/DR1/DQ5/DQ6/DR14
97DQ2/DQ8/DQ9/DR15/DR16
97DR1/DR10/DR14/DR15/DR16/DR103/DQ2/DQ4/DQ5/DQ6/DQ8/DQ9
97DQ9/DQ8/DQ6/DQ5/DQ2/DQ4
57DR1/DR10/DR14/DR15/DR16/DR51/DR103/DQ2/DQ4/DQ5/DQ6/DQ8/DQ9
Class II single antigen (n=22)
 One Lambda LABScreen single antigen class II (n=12)100DQ5/DQ9/DQ8/DQ2/DQ4/DR16/DQ6/other
100DQ9/DQ5/DQ4/DQ8/DQ2/DR52/other
100DQ2/DQ5/DQ6/DQ8/DQ9/DQ4/DR16/DR52
100DQ8/DQ9/DQ2/DQ6/DQ5/DQ4/DQ7
100DR7/DR52/DR16/DQ4/DQ2/DQ8/DQ9/DQ6/DQ5
98DQ8/DQ9/DQ2/DQ4/DQ6/DQ5/DR16
98DQ8/DQ9/DQ2/DQ6/DQ4/DR16/DQ5/other
98DQ5/DQ6/DQ8/DQ9/DQ2/DQ4/DR52
93DQ8/DQ9/DQ2/DQ4/DR16/DR52
24DQ5/DQ6/DQ2/DQ9/DQ8/DQ4
23DQ8/DQ9/DQ2/DQ4/DR16/DQ6/DQ5
22Other/DQ8/DQ9/DQ2/DQ4/DR16/DQ6/DQ5
 Immucor Lifecodes LSA class II (n=10)93DQ2/DQ5/DQ6/DQ8/DQ9/other
91DQ2/DQ4/DQ6/DQ8/DQ9
81DQ2/DQ8/DQ9/DQ7/DQ4
67DQ8/DQ9/DQ2/DQ4
33DQ2/DQ4/DQ5/DQ6/DQ8/DQ9
33DQ2/DQ8/DQ6/DQ9/DQ5/DR4
33DQ6/DQ5/DQ8/DQ2/DQ9/DQ4/DQ7
33DQ6/DQ5/DQ8/DQ2/DQ9/DQ4/DQ7
32DQ2/DQ3/DQ4/DQ6/DQ1/DQ5
24DQ2/DQ4/DQ5/DQ6/DQ8/DQ9

Abbreviation: %PRA, percent reactive antibody. The kits were from the following companies: One Lambda (Canoga Park, CA, USA) and Immucor Lifecodes (Stamford, CT, USA)..


정도관리물질의 제조에 도움을 주신 박준우 선생님과 면역검사실 선생님들 그리고 헌혈실 정혜경, 김혜미 간호사 및 정미정 연구원에게 감사의 뜻을 전한다.

  1. Park MH. A questionnaire survey of HLA laboratories in Korea (1993). J Korean Soc Transplant 1993;7:245-8.
  2. Park MH, Whang DH, Kim BC. Two-year study on the HLA typing proficiency survey in Korea, 1996-1998. Korean J Clin Pathol 1999;19:714-22.
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