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pISSN 2950-9114 eISSN 2950-9122
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Report On Proficiency Testing

Lab Med Qual Assur 2024; 46(1): 1-37

Published online March 31, 2024

https://doi.org/10.15263/jlmqa.2024.46.1.1

Copyright © Korean Association of External Quality Assessment Service.

Report of Korean Association of External Quality Assessment Service on Histocompatibility Testing (2019–2022)

Eun-Suk Kang* and Jong Kwon Lee*

Department of Laboratory Medicine and Genetics, Samsung Medical Center, Sungkyunkwan University School of Medicine, Seoul, Korea

Correspondence to:Eun-Suk Kang
Department of Laboratory Medicine and Genetics, Samsung Medical Center, Sungkyunkwan University School of Medicine, 81 Irwon-ro, Gangnam-gu, Seoul 06351, Korea
Tel +82-2-3410-2703
E-mail eskang@skku.edu

*These authors contributed equally to this work as the first author.

This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.

Here, we report the results of the histocompatibility proficiency testing performed by the Korean Association of External Quality Assessment Service from 2019 to 2022. The HLA-B51 and HLA-DPB1 typing programs were adopted in 2020 and 2021, respectively. The HLA-B*58:01 typing program was commenced from the second trial in 2022 as a demonstration program. The directly prepared proficiency testing specimens of whole blood, sera, and mononuclear cell suspensions were distributed to participants biannually. The enrollment of participants was expanded for high-resolution human leukocyte antigen (HLA) typing, B cell flow cytometry crossmatching (B-FCMXM), and single antigen bead antibody identification (SABID) tests. The phase and method combination for HLA crossmatching demonstrated variability in terms of laboratory results, and the grading criteria were revised in 2020. The response rate was 100% except that for B-FCMXM. The accuracy rates were generally very high; however, frequent input or nomenclature errors for HLA typing results and frequent non-consensus (code 505) and wide distribution of semiquantitative Center for Disease Control and Prevention results between laboratories were noted. The statistical analysis of reported HLA antibodies rendered the determination of unacceptable responses easier than earlier methods; however, the absence of consensus criteria meant that the responses were not graded yet. Continuous efforts to improve the proficiency programs and the education for standardization between laboratories are mandatory.

Keywords: Histocompatibility, Laboratory proficiency testing, Korean Association of External Quality Assessment Service

조직적합성(histocompatibility) 검사는 성공적인 이식을 위해서는 필수적인 검사이다. 조직적합성항원(human leukocyte antigen, HLA) 또는 주조직복합체(major histocompatibility complex) 형별검사(HLA typing)는 장기 및 조혈모세포 이식 전 최적의 공여자를 선별하고, HLA 교차시험(HLA crossmatching) 및 HLA 항체검사(HLA antibody identification)를 통해 부적합 공여자를 배제하고 이식 후 경과를 예측하는 데 중요한 정보를 제공한다. 일부 특정 HLA 형은 질병연관성이 높아 특정 질병을 진단하는 것에 이용된다. 특히 국내에서 이식을 위한 타인 공여자의 매칭은 질병관리본부 장기이식관리센터(Korean Network for Organ Sharing)의 중앙화된 정보시스템을 통해 이루어지고 있어 여러 다른 기관에서 이루어진 검사결과를 바탕으로 선정하게 된다. 그러므로 기관 간 HLA 검사의 표준화와 호환성은 매우 중요하다.

대한진단검사정도관리협회(‘대한임상검사정도관리협회’에서 변경)에서는 2000년부터 대한진단검사의학회 정도관리분과 사업으로 시행되어 온 조직적합성 검사 외부정도관리 프로그램을 2018년부터 대체하여 시행해 오고 있다. 첫해인 2018년의 신빙도조사 결과는 2019년도에 보고한 바 있다[1].

본 보고에서는 2019년부터 2022년까지 시행된 조직적합성 검사 신빙도조사 결과를 정리하고 그간의 유의한 변화와 향후 전망을 제시하고자 하였다.

1. 조사항목

조직적합성 검사 프로그램은 연 2회에 걸쳐 고해상도 및 저해상도 HLA typing, HLA B27 typing, HLA crossmatching 그리고 HLA antibody screening, phenotyping과 identification 항목과 더불어 2020년부터는 HLA B51 typing 그리고 2022년 2차부터는 HLA B*58:01 typing이 시행되었다. 신선한 세포로 배송되어야 하는 특성상 당일 혹은 익일에 검체가 전달되도록 신속 예약배송시스템을 활용하였고, 실온상태에서 세포 신선도를 보증하기 위하여 외부 기온이 높지 않은 4월 첫째 주와 10월 둘째 주 월요일에 발송하였다.

2. 외부신빙도조사용 정도관리물질

검체의 제조는 자가제조물질 개발 용역연구를 맡은 삼성서울병원에서 수행하였다. 검체 제조를 위한 혈액을 확보하기 위하여 연구윤리위원회(institutional review board)의 심의를 얻었으며 공지문을 통해 자원자를 모집하였다. 자원자는 혈액공여자 선별기준에 따라 적합성을 확인하였다. 자가 제조된 물질은 분주 및 라벨링을 마친 후 대한진단검사정도관리협회로 즉시 운반되어 포장된 후 각 참여기관으로 당일 발송되었다. 국내 특급우편을 이용하여 혈청은 냉장, 세포는 실온상태에서 배송되었으며 발송 후 24–48시간 내에 검사실에 도착될 수 있도록 하였다. 제주도의 경우에는 항공우편을 이용하여 72시간 내에 도착될 수 있도록 하였다.

1) HLA typing 전혈 제조

자원자들에서 미리 HLA typing을 시행하여 교차시험에서 활용할 수 있는 HLA 형별 대상자를 확보하였다. 발송 당일 선별한 자원자들로부터 ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) 전혈을 채집한 후 시험관당 1 mL씩 즉시 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

2) HLA-B27, -B51, -B*58:01 typing 전혈 제조

자원자들에서 미리 HLA typing을 시행하여 HLA-B27, -B51 그리고 –B*58:01 양성과 음성 대상자를 확보하였다. 발송 당일 선별한 자원자들로부터 EDTA 전혈을 채집한 후 각 시험관당 1 mL씩 즉시 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

3) HLA crossmatching용 단핵구 부유액 제조

교차시험에서 적절한 반응을 보이는 HLA 형을 가진 자원자로부터 발송 당일 혈액분반술을 통해 필요한 수의 단핵구를 채집하였다. 채집 즉시 0.5–1×107/mL의 농도가 되도록 자가혈장으로 희석한 후 시험관당 1 mL씩 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

4) HLA crossmatching 및 antibody test용 혈청 제조

신장이식 대기 중 단일항원기반항체동정(single antigen bead identification, SABID) 검사를 통해 항원 특이성이 밝혀진 환자로부터 서면동의서를 획득한 후 약 100 mL의 전혈을 채집하였다. 채집 전 담당 임상의로부터 환자 상태에 대한 자문을 구하였으며, 상태에 따라 한번에 100 mL 또는 2차에 나누어 총 100 mL를 채집하였다. 채집은 헌혈실에서 간호사의 채혈 및 담당의사의 관찰하에 진행하였다. 약 2시간 방치하여 충분한 혈액응고가 진행된 후 3,000 rpm에서 15분간 원심분리한 후 혈청을 회수하였다. 혈청은 20 µm 필터를 사용하여 처리 후 영하 70도에 냉동 보관하였다. 발송 당일 해동하여 다시 한번 원심분리한 후 상층액을 시험관당 약 500 µL씩 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

3. 결과 판정 및 분석

결과는 차세대신빙도사업 홈페이지에 입력하도록 하였고, 입력기간은 발송 후 10일에 종료하였다. 이후 입력결과에 대한 데이터 오류를 검증한 후 통계분석을 시행하였다.

모든 항목은 정성검사에 준하여 판정하였으며 기대결과(intended response)는 신뢰할 만한 정답이 있는 경우와 그렇지 않은 경우에는 보고한 기관에서 80% 이상의 일치를 보이는 결과로 하였다. 단, HLA crossmatching의 경우 민감도가 다른 두 가지 이상의 검사법을 반드시 시행하도록 권고하고 있는 바 민감도가 높은 검사에서 80% 이상의 일치를 보이지 않는 경우 하위 검사의 결과는 ‘code 505’로 기술하고 판정 제외하였는데, 2020년에 전문가 회의를 통해 판정기준을 개정하였다. 새로운 판정기준에서는 민감도가 높은 유세포교차시험(flow cytometry crossmatching, FCMXM) 결과의 negative consensus의 기준을 90%로 높였고, FCMXM 결과 판정 시에는 시험에 사용한 혈청이 세포에 대한 공여자 특이항체(donor-specific antibodies, DSAs)를 가지고 있는 경우 역시 negative consensus의 기준을 90%로 높여 판정에 반영하였다(Table 1).

Table 1 . 2020 Revised grading criteria for human leukocyte antigen crossmatching test.

CategoryCrossmatching methodsGrades for negative responseGrades for positive response
CDC
1CDC consensus positive (80%)UnacceptableAcceptable
2CDC consensus negative (90%) and FCM negative consensusAcceptableUnacceptable
3CDC consensus negative (90%) and FCM positive (≥10%)AcceptableCode 505
4No consensusCode 505Code 505
FCM
AFCM consensus positive (80%)UnacceptableAcceptable
BFCM consensus negative (90%) and DSA negativeAcceptableUnacceptable
CFCM consensus negative (90%) and DSA positive (>50%)AcceptableCode 505
DNo consensusCode 505Code 505

Abbreviations: CDC, complement dependent cytotoxicity; FCM, flow cytometry; Code 505, not graded; DSA, donor-specific antibody..



HLA crossmatching의 반정량 결과와 HLA 항체 항원성 동정 결과는 별도로 판정기준을 부여하지 않았다.

1. 신빙도조사사업 참여기관 및 항목 현황

Table 2에 2019년부터 2022년 사이 각 항목에 참여한 기관들의 수를 정리하였다. HLA typing 검사의 경우 유전형(generic type)과 대립유전자형(allelic type) 그리고 혈청형(serological equivalent)을 보고하도록 하고 있는데, 매년 대립유전자형 보고 기관이 증가하는 것을 알 수 있다. HLA crossmatching의 경우는 B세포 FCMXM (B-FCMXM) 시행기관이 증가양상을 보였다. HLA antibody 검사의 경우 phenotyping 검사를 시행하고 있는 기관은 지속적으로 약 10기관으로 유지되고 있으며, SABID 시행기관은 2020년 2차부터 증가하는 경향이 관찰되면서 선별검사(screening) 기관보다 더 많았다. 질병 혹은 약물반응 관련 HLA 형별검사는 HLA-B27에 더하여 2019년부터는 HLA-B51, 그리고 2022년 2차부터는 HLA-B*58:01 외부정도관리 프로그램을 도입하였다. 각 항목별로 회신율은 B-FCMXM을 제외하고는 100%였는데, B-FCMXM의 경우 검체 혹은 방법상의 문제로 결과를 보고하지 못하는 기관이 지속적으로 관찰되었다(Table 2).

Table 2 . Laboratories participating in histocompatibility program from 2019 to 2022.

Test itemsNo. of labs
2019202020212022
1st2nd1st2nd1st2nd1st2nd
HLA typing*
Generic type6565666766676565
Allelic type2526282828313229
HLA crossmatching
T-CDC-Direct4545434444444344
T-CDC-AHG4747454746464646
B-CDC-Direct2222212123242425
T-FCMXM3333313333333334
B-FCMXM23 (1)2322 (2)27 (1)262627 (1)28
HLA antibody
Screening2121212222212122
Phenotyping1110101010101011
Single antigen identification2222212424242425
HLA genotyping
HLA B27 typing6161606160616363
HLA B51 typing2828282929303030
HLA B58:01 typing-------8

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

*The number of labs estimated according to the test for HLA-A/B/DRB1 loci. †The numbers in parenthesis indicate the labs that did not respond..



2. 조직적합성 형별검사(HLA typing)

참여한 모든 기관이 DNA를 사용하여 polymerase chain reaction (PCR)에 기반한 방법을 사용하여 결과를 보고하였다. 보고기간에 검사에 사용한 시약 및 제조사에 미미한 변화가 있었으나 가장 주목할 만한 변화는 2021년 2차부터 차세대염기서열 기반(next generation sequence, NGS) 형별검사가 유의하여 증가하였다는 것이다(HLA-A 기준 7기관에서 11기관). 저해상도 형별검사의 경우 sequence specific oligonucleotide probe reverse와 sequence specific primers가 고르게 사용되는 방법이었다. 단지 저해상도 검사의 경우 현재 정도관리 입력시스템상 국내 기관들에서 사용하는 시약을 중복하여 모두 입력하고 있지는 않아서 정확한 시약 사용현황을 파악하기 어려운 문제점이 있다. Table 3에 2022년 검사법 및 사용 시약들에 대해 정리하였다(Table 3). Fig. 1은 2019년 이후 각 회차별 각 유전자좌(loci)에 대하여 generic type과 allelic type을 보고한 기관들의 수를 표시하였다. 아직도 HLA-C와 HLA-DPB1 검사를 시행 및 보고하는 기관의 수는 HLA-A, B, DR, DQB1 loci에 비해 적으나 전반적으로 allelic type을 보고하는 기관이 증가 추세임을 볼 수 있다(Fig. 1).

Table 3 . HLA typing methods and frequently used kits.

Methods/kits2022
1st2nd
HLA-AHLA-BHLA-CHLA-DRHLA-DQHLA-DPHLA-AHLA-BHLA-CHLA-DRHLA-DQHLA-DP
PCR-SSP2323132313024241424140
Micro SSP Generic Trays, One Lambda
HLA PCR/SSP Kit, Biosewoom
PCR-SSOP2828132823127271227221
LABType SSO, One Lambda
INNO LiPA HLA kit, Fujirebio
SBT16161616911515141591
SeCore SBT kit, One Lambda
Allele SEQR HLA, GenDx
AVITA cross HLA SBT kit, BIOWITHUS
AVITA plus HLA SBT kit, BIOWITHUS
AVITA HLA SBT kit, BIOWITHUS
NGS1212111210613131213128
NGSgo HLA-NGS (6 loci), GenDx
AllType NGS (11 loci), One Lambda
Others444441222211
Total83835783599818154815811

The use of LIFECODES HLA SSO typing kit was stopped since 2021. The instruments were from the following companies: One Lambda (Canoga Park, CA, USA), Biosewoom (Seoul, Korea), Fujirebio Inc. (Tokyo, Japan), GenDx (Utrecht, The Netherlands), and Biowithus Inc. (Seoul, Korea)..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; PCR, polymerase chain reaction; SSP, sequence specific primers; SSOP, sequence specific oligonucleotide probe; SBT, sequence-based typing; NGS, next generation sequence..



Figure 1. Distribution of laboratories reporting human leukocyte antigen (HLA) generic type and allelic type according to HLA loci during the trials from 2019 to 2021.

각 회차별 보고된 결과들을 Tables 411에 정리하였다. 실제 잘못된 형을 보고한 기관은 2019년도에 약 1.5%에 해당하였으며, 그 이후 unacceptable로 분류된 경우는 대부분 입력 시 오류 또는 용어(nomenclature) 표기오류에 해당하였다(Tables 411).

Table 4 . Results of HLA class I typing in 2019.

TrialsSpecimenResolutionHLA-ANo. of labsHLA-BNo. of labsHLA-CNo. of labs
1stIHL-19-01Generic typeA*02/A*2465B*55/B*5965C*011
C*01/Blank38
Allelic typeA*02:06/A*24:0220B*55:02/B*59:0120C*01:02/C*01:025
A*02:06G/A*24:02G5B*55:02G/B*59:01G5C*01:02/C*99:9915
C*01:02G/C*01:02G2
C*01:02G/C*99:993
Serological equivalentA2/A2464B55/B5964Cw11
Cw1/Blank39
IHL-19-02Generic typeA*24/A*3365B*44/B*5965C*01/C*0739
Allelic typeA*24:02/A*33:0319B*44:03/B*59:0120C*01:02/C*07:011
A*24:02/A*33:03G1B*44:03/B*59:01G4C*01:02/C*07:01G4
A*24:02G/A*33:03G5B*44:03G/B*59:01G1C*01:02/C*07:0615
C*01:02G/C*07:01G4
C*01:02G/C*07:061
Serological equivalentA24/A3364B44/B5964Cw1/Cw740
2ndIHL-19-03Generic typeA*02/A*3365B*44/B*4865C*08/C*1438
Allelic typeA*02:06/A*33:0321B*44:03/B*48:0122C*08:03/C*14:0324
A*02:06/A*33:03G1B*44:03G/B*48:01G4C*08:03G/C*14:03G1
A*02:06G/A*33:03G4
Serological equivalentA2/A3365B44/B4865Cw8/Blank33
Cw8/Cw11
Cw8/Cw146
IHL-19-04Generic typeA*24/A*3065B*13/B*5165C*06/C*1438
Allelic typeA*24:02/A*30:0122B*13:02/B*51:0122C*06:02/C*14:0221
A*24:02G/A*30:01G4B*13:02G/B*51:01G4C*06:02G/C*14:02G4
Serological equivalentA24/A3065B13/B5165Cw6/Blank33
Cw6/Cw11
Cw6/Cw146

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 5 . Results of HLA class II typing in 2019.

TrialSpecimenResolutionHLA-DRNo. of labsHLA-DQNo. of labs
1stIHL-19-01Generic typeDRB1*11/DRB1*1465DQB1*03/DQB1*0536
Allelic typeDRB1*11:01/DRB1*14:0521DQB1*03:01/DQB1*05:038
DRB1*11:01G/DRB1*14:051
DRB1*11:01G/DRB1*14:05G3
Serological equivalentDR11/DR1464DQ7/DQ536
IHL-19-02Generic typeDRB1*04/DRB1*051DQB1*02/DQB1*0436
DRB1*04/DRB1*0764
Allelic typeDRB1*04:05/DRB1*07:0122DQB1*02:02/DQB1*04:0112
DRB1*04:05G/DRB1*07:01G3DQB1*02:02G/DQB1*04:01G1
Serological equivalentDR4/DR51DQ2/DQ436
DR4/DR763
2ndIHL-19-03Generic typeDRB1*13/DRB1*1565DQB1*03/DQB1*0641
Allelic typeDRB1*13:01/DRB1*15:021DQB1*03:01/DQB1*06:0414
DRB1*13:02/DRB1*15:0120DQB1*03:01G/DQB1*06:04G1
DRB1*13:02/DRB1*15:01G1
DRB1*13:02G/DRB1*15:01G4
Serological equivalentDR13/DR1565DQ6/DQ744
IHL-19-04Generic typeDRB1*07/DRB1*1165DQB1*02/DQB1*0341
Allelic typeDRB1*07:01/DRB1*11:0121DQB1*02:02/DQB1*03:0214
DRB1*07:01G/DRB1*11:011DQB1*02:02G/DQB1*03:02G1
DRB1*07:01G/DRB1*11:01G4
Serological equivalentDR7/DR1165DQ2/DQ842

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 6 . Results of HLA class I typing in 2020.

TrialsSpecimenResolutionHLA-ANo. of labsHLA-BNo. of labsHLA-CNo. of labs
1stIHL-20-01Generic typeA*02/A*2466B*40/B*5166C*03/C*1440
Allelic typeA*02:01/A*24:0225B*40:02/B*51:0125C*03:03/C*14:0224
A*02:01G/A*24:02G3B*51:01G/B*40:02G3C*03:03G/C*14:02G3
Serological equivalentA2/A2466B51/B6166Cw1/Cw91
Cw3/Blank2
Cw9/Blank33
Cw9/Cw1/Blank1
Cw9/Cw144
IHL-20-02Generic typeA*02/A*3366B*44/B*5966C*01/C*1440
Allelic typeA*02:06/A*33:0324B*44:03/B*59:0125C*01:02/C*14:0324
A*02:06/A*33:03G1B*44:03G/B*59:01G3C*01:02G/C*14:031
A*02:06G/A*33:03G3C*01:02G/C*14:03G2
Serological equivalentA2/A3366B44/B5966Cw1/Blank37
Cw1/Cw144
2ndIHL-20-03Generic typeA*26/A*3367B*15/B*46/67C*01/C*0339
Allelic typeA*26:02/A*33:0324B*15:01/B*46:0125C*01:02/C*03:0324
A*26:02/A*33:03G4B*46:01G/B*15:01G3C*01:02G/C*03:03G3
Serological equivalentA26/A3367B46/B6267Cw1/Cw940
IHL-20-04Generic typeA*01/A*0267B*543C*011
B*54/Blank64C*01/Blank39
Allelic typeA*01:01/A*02:0125B*54:01/B*54:014C*01:02/C*01:024
A*01:01G/A*02:01G3B*54:01/B*99:9921C*01:02/C*99:9920
B*54:01G/B*54:01G1C*01:02G/C*01:02G1
B*54:01G/B*99:992C*01:02G/C*99:992
Serological equivalentA1/A267B543Cw11
B54/Blank64Cw1/Blank39

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 7 . Results of HLA class II typing in 2020.

TrialsSpecimenResolutionHLA-DRNo. of labsHLA-DQNo. of labs
1stIHL-20-01Generic typeDRB1*141DQB1*03/DQB1*0545
DRB1*14/Blank65
Allelic typeDRB1*14:03/DRB1*14:0525DQB1*03:01/DQB1*05:0316
DRB1*14:05G/DRB1*14:033DQB1*05:03G/DQB1*03:01G1
Serological equivalentDR14/Blank22DQ5/DQ745
DR14/DR140344
IHL-20-02Generic typeDRB1*04/DRB1*1366DQB1*04/DQB1*0645
Allelic typeDRB1*04:05/DRB1*13:0225DQB1*04:01/DQB1*06:0416
DRB1*04:05G/DRB1*13:02G3DQB1*04:01G/DQB1*06:04G1
Serological equivalentDR4/DR1366DQ4/DQ645
2ndIHL-20-03Generic typeDRB1*143DQB1*032
DRB1*14/Blank64DQB1*03/Blank45
Allelic typeDRB1*14:06/DRB1*14:064DQB1*03:01/DQB1*03:012
DRB1*14:06/DRB1*99:9924DQB1*03:01/DQB1*99:9914
DQB1*03:01G/DQB1*03:01G2
Serological equivalentDR143DQ72
DR14/Blank64DQ7/Blank45
IHL-20-04Generic typeDRB1*04/DRB1*0867DQB1*04/DQB1*0647
Allelic typeDRB1*04:05/DRB1*08:0325DQB1*04:01/DQB1*06:0116
DRB1*04:05G/DRB1*08:03G3DQB1*04:01/DQB1*06:01G2
Serological equivalentDR4/DR867DQ4/DQ647

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 8 . Results of HLA class I typing in 2021.

TrialsSpecimenResolutionHLA-ANo. of labsHLA-BNo. of labsHLA-CNo. of labs
1stIHL-21-01Generic typeA*31/A*3366B*35/B*4466C*03/C*1438
Allelic typeA*31:01/A*33:0324B*35:01/B*44:0325C*03:03/C*14:0324
A*31:01/A*33:03G4B*35:01G/B*44:03G3C*03:03G/C*14:03G3
Serological equivalentA31/A3365B35/B4465Cw9/Blank34
Cw9/Cw11
Cw9/Cw143
IHL-21-02Generic typeA*02/Blank66B*35/B*4066C*04/C*0838
Allelic typeA*24:02/A*24:022B*35:01/B*40:0625C*04:01/C*08:0124
A*24:02/A*99:9923B*35:01G/B*40:06G3C*04:01G/C*08:01G3
A*24:02G/A*24:02G3
Serological equivalentA2/Blank1B35/B6165Cw4/Cw838
A24/Blank64
2ndIHL-21-03Generic typeA*02/A*2467B*07/B*3767C*06/C*0739
Allelic typeA*02:01/A*24:011B*07:02/B*37:0128C*06:02/C*07:0226
A*02:01/A*24:0227B*07:02G/B*37:01G3C*06:02G/C*07:02G3
A*02:01G/A*24:02G3
Serological equivalentA2/A2465B7/B3765Cw6/Cw738
IHL-21-04Generic typeA*02/A*3367B*54/B*5567C*01/Blank39
Allelic typeA*02:01/A*33:0327B*54:01/B*55:0228C*01:02/C*01:023
A*02:01/A*33:03G1B*54:01G/B*55:02G3C*01:02/C*99:9923
A*02:01G/A*33:03G3C*01:02G/C*01:02G2
C*01:02G/C*99:991
Serological equivalentA2/A3365B54/B5565Cw1/Blank38

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 9 . Results of HLA class II typing in 2021.

TrialsSpecimenResolutionHLA-DRNo. of labsHLA-DQNo. of labsDPNo. of labs
1stIHL-21-01Generic typeDRB1*04/DRB1*1366DQB1*04/DQB1*0647DPB1*2/DPB1*33
Allelic typeDRB1*04:10/DRB1*13:0225DQB1*04:02/DQB1*06:0416
DRB1*04:10G/DRB1*13:02G3DQB1*04:02G/DQB1*06:04G1
Serological equivalentDR4/DR1365DQ4/DQ646DPB1*02:01/DPB1*03:013
IHL-21-02Generic typeDRB1*09/DRB1*1166DQB1*03/Blank47DPB1*3/DPB1*43
Allelic typeDRB1*09:01/DRB1*11:0125DQB1*03:01/DQB1*03:0316DPB1*03:01/DPB1*04:023
DRB1*09:01G/DRB1*11:01G3DQB1*03:01G/DQB1*03:03G1
Serological equivalentDR9/DR1165DQ7/DQ946
2ndIHL-21-03Generic typeDRB1*01/DRB1*1067DQB1*05/Blank48DPB1*03/DPB1*047
Allelic typeDRB1*01:01/DRB1*10:0128DQB1*05:01/DQB1*05:012DPB1*03:01/DPB1*04:027
DRB1*01:01G/DRB1*10:01G3DQB1*05:01/DQB1*99:9918
DQB1*05:01G/DQB1*05:01G1
Serological equivalentDR1/DR1065Blank1
DQ5/Blank46
IHL-21-04Generic typeDRB1*09/DRB1*1567DQB1*03/DQB1*0648DPB1*051
DPB1*05/Blank6
Allelic typeDRB1*09:01/DRB1*15:0128DQB1*03:03/DQB1*06:0220DPB1*05:01/DPB1*05:011
DRB1*09:01G/DRB1*15:01G3DQB1*03:03G/DQB1*06:02G1DPB1*05:01/DPB1*99:996
Serological equivalentDR9/DR1565DQ6/DQ947

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 10 . Results of HLA class I typing in 2022.

TrialsSpecimenResolutionHLA-ANo. of labsHLA-BNo. of labsHLA-CNo. of labs
1stIHL-22-01Generic typeA*01/A*1165B*37/B*4065C*03/C*0639
Allelic typeA*01:01/A*11:0130B*37:01/B*40:0130C*03:04/C*06:0230
A*01:01G/A*11:01G2B*37:01G/B*40:01G2C*06:02G/C*03:04G2
Serological equivalentA1/A1165B37/B6065Cw10/Cw640
IHL-22-02Generic typeA*02/A*2465B*15/B*4865C*03/C*0439
Allelic typeA*02:06/A*24:0230B*15:01/B*48:0130C*03:04/C*04:0128
A*02:06G/A*24:02G2B*48:01G/B*15:01G2C*04:01G/C*03:04G2
Serological equivalentA2/A2465B48/B6265Cw10/Cw440
2ndIHL-19-03Generic typeA*01/A*0265B*54/B*552C*01/Blank39
B*54/Blank63
Allelic typeA*01:01/A*02:0128B*54:01/B*54:013C*01:02/C*01:022
A*01:01G/A*02:01G1B*54:01/B*99:9925C*01:02/C*99:9925
B*54:01G/B*99:991
Serological equivalentA1/A265B54/Blank65Cw1/Blank40
IHL-19-04Generic typeA*33/Blank65B*44/Blank65C*14/Blank39
Allelic typeA*33:03/A*33:033B*44:03/B*44:033C*14:03/C*14:032
A*33:03/A*99:9926B*44:03/B*99:9926C*14:03/C*99:9925
Serological equivalentA33/Blank65B44/Blank65Blank25
Cw1/Blank6
Cw14/Blank9

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 11 . Results of HLA class II typing in 2022.

TrialsSpecimenResolutionHLA-DRNo. of labsHLA-DQNo. of labsDPNo. of labs
1stIHL-22-01Generic typeDRB1*09/DRB1*1065DQB1*03/DQB1*0547DPB1*05/Blank8
Allelic typeDRB1*09:01/DRB1*10:0130DQB1*03:03/DQB1*05:0122DPB1*05:01/DPB1*99:998
DRB1*09:01G/DRB1*10:01G2
Serological equivalentDR9/DR1065DQ5/DQ947
IHL-22-02Generic typeDRB1*04/DRB1*1465DQB1*03/DQB1*0547DPB1*02/DPB1*058
Allelic typeDRB1*04:06/DRB1*14:013DQB1*03:02/DQB1*05:0322DPB1*02:01/DPB1*05:018
DRB1*04:06/DRB1*14:5427
DRB1*04:06G/DRB1*14:01G2
Serological equivalentDR4/Blank2DQ5/DQ847
DR4/DR1463
2ndIHL-19-03Generic typeDRB1*04/DRB1*0865DQB1*04/DQB1*0647DPB1*03/DPB1*0510
Allelic typeDRB1*04:05/DRB1*08:0328DQB1*04:01/DQB1*06:0121DPB1*03:01/DPB1*05:0110
DRB1*04:05G/DRB1*08:03G1
Serological equivalentDR4/DR865DQ4/DQ647
IHL-19-04Generic typeDRB1*13/Blank65DQB1*06/Blank47DPB1*02/DPB1*0410
Allelic typeDRB1*13:02/DRB1*13:023DQB1*06:04/DQB1*99:9921DPB1*02:01/DPB1*:1
DRB1*13:02/DRB1*99:9925DPB1*02:01/DPB1*04:019
DRB1*13:02G/DRB1*99:991
Serological equivalentDR13/Blank65DQ6/Blank47

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



3. 특수조직적합성 형별검사(HLA-B27, -B51, -B*58:01 typing)

강직성 척수염(ankylosing spondylitis)과 관련성이 있는 HLA-B27 형별검사는 지속적으로 60개 이상의 기관들에서 시행하고 있으며, 한 기관에서 유세포분석법(flow cytometry)을 사용 중이었는데, 모든 기관에서 지속적으로 100%의 정답률을 유지하고 있었다(Table 12). 2018년에 설문조사를 통해 시행기관 및 외부정도관리 프로그램 참여의사를 파악한 후 2020년 1차부터는 베쳇병(Behcet disease)과 관련성이 있는 HLA-B51 형별검사를 도입하였는데, 30여 개 기관에서 지속적으로 참여 중인데, unacceptable 결과를 보고하는 기관이 관찰되었다(Table 13). 2022년 2차부터는 약물, 특히 allopurinol 과민반응과 관련이 잘 알려진 HLA-B*58:01에 대한 형별검사를 시범사업으로 도입하였다. 총 8개 기관이 참여하였는데, sequence-based typing 기반 시약을 사용한 기관이 한 기관이었고, 그 외 7개 기관은 ‘other method’로 입력하여 상세한 정보를 파악하기 어려웠다(Table 14).

Table 12 . Methods and results of HLA-B27 typing.

Methods/manufacturers2019202020212022
1st2nd1st2nd1st2nd1st2nd
IB27-19-01IB27-19-02IB27-19-03IB27-19-04IB27-20-01IB27-20-02IB27-20-03IB27-20-04IB27-21-01IB27-21-02IB27-21-03IB27-21-04IB27-22-01IB27-22-02IB27-22-03IB27-22-04
PresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentAbsentPresentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsent
Flow cytometry1111111111111111
Becton Dickinson1111111111111111
Other methods22222222111111
Others22222222111111
PCR40403838373729292828262624242424
BioCore8888777766554444
Biosewoom18181616171717171717171717171717
Genotech111111111111
LDT4444444444333333
PCR-SSP9999887755555555
Biowithus Inc.9999887755555555
Real-time PCR18182020202022222626282832323232
Genetree1111112222
BioCore111111
Bioneer5555445555555555
Biosewoom10101111121212121212121212121212
Osang Healthcare*33444444889912121212
Total61616161606061616060616163636363

The instruments were from the following companies: Becton Dickinson (Franklin Lakes, NJ, USA), BioCore (Seoul, Korea), Biosewoom (Seoul, Korea), GenDx (Utrecht, The Netherlands), Biowithus Inc. (Seoul, Korea), Genetree (Seoul, Korea), Bioneer (Daejeon, Korea), and Osang Healthcare (Anyang, Korea)..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; PCR, polymerase chain reaction; SSP, sequence specific primers..

*Previously Infopia until 2020..



Table 13 . Methods and results of HLA-B51 typing.

Methods/manufacturers2019202020212022
1st2nd1st2nd1st2nd1st2nd
IB51-19-01IB51-19-02IB51-19-03IB51-19-04IB51-20-01IB51-20-02IB51-20-03IB51-20-04IB51-21-01IB51-21-02IB51-21-03IB51-21-04IB51-22-01IB51-22-02IB51-22-03IB51-22-04
PresentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsent
Nested PCR31233333333222222
LDT31233333333222222
Other methods4433444422444444
BioCore111111
Biosewoom1111111111111111
Biowithus Inc.11111100
Others2211223311222222
PCR6666555544444444
Amplicon11111111
Biosewoom5555444444444444
PCR-SSP101099777777665555
BioCore4433333333222222
Biosewoom6666444444443333
Real-time PCR5577991010131314141411141515
Genetree11111111111111
Biosewoom2222445544444444
Infopia33444444889991191010
Total28127282828282929292930302911293030

The instruments were from the following companies: BioCore (Seoul, Korea), Biosewoom (Seoul, Korea), Biowithus Inc. (Seoul, Korea), and Genetree (Seoul, Korea)..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; PCR, polymerase chain reaction; SSP, sequence specific primers..



Table 14 . Methods and results of HLA-B*58:01 typing.

Methods/manufacturers2022-2nd
IB58-22-01PresentIB58-22-02 Absent
Other methods77
Micro SSP Allele Specific HLA Class I DNA Typing Tray - B*58, One Lambda11
Others66
Sequence-based typing11
AVITA HLA-B SBT kit, BIOWITHUS11
Total88

The instruments were from the following companies: One Lambda (Canoga Park, CA, USA) and Biowithus Inc. (Seoul, Korea), respectively..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



4. 조직적합성 교차시험검사(HLA crossmatching)

각 회차당 두 개의 혈청과 두 개의 단핵구부유액을 배송하여 4쌍씩의 교차시험을 시행하도록 하였으며, 총 8쌍의 결과를 얻었으며 그 결과를 Tables 1518에 정리하였다.

Table 15 . Methods and results of HLA crossmatching in 2019.

TrialsSpecimenMethodsTotal no. of labsQualitative results (no. of labs)Semi-quantitative results (no. of labs)Intended response
NegativePositiveNANegative1:11:21:41:81:161:32>1:32
1stIX-19-01 + IX-19-03T-CDC-Direct45045391914Positive
T-CDC-AHG47047282116Positive
B-CDC-Direct220222146Positive
T-FCM33033Positive
B-FCM230221Positive
IX-19-01 + IX-19-04T-CDC-Direct4545045Negative
T-CDC-AHG4747047Negative
B-CDC-Direct22211211Negative
T-FCM33330Negative
B-FCM231661Code 505
IX-19-02 + IX-19-03T-CDC-Direct4504541216103Positive
T-CDC-AHG470471692011Positive
B-CDC-Direct22022145102Positive
T-FCM33033Positive
B-FCM230221Positive
IX-19-02 + IX-19-04T-CDC-Direct45450Negative
T-CDC-AHG47470Negative
B-CDC-Direct22220Negative
T-FCM33312Negative
B-FCM232201Negative
2ndIX-19-05 + IX-19-07T-CDC-Direct45243211912812Positive
T-CDC-AHG4704718781832Positive
B-CDC-Direct220221678Positive
T-FCM33033Positive
B-FCM23023Positive
IX-19-05 + IX-19-08T-CDC-Direct4545045Negative
T-CDC-AHG4747047Negative
B-CDC-Direct22211211Negative
T-FCM33330Negative
B-FCM231112Code 505
IX-19-06 + IX-19-07T-CDC-Direct452421248823Code 505
T-CDC-AHG475425117116421Positive
B-CDC-Direct226166213514Code 505
T-FCM33132Positive
B-FCM23122Positive
IX-19-06 + IX-19-08T-CDC-Direct4545045Negative
T-CDC-AHG4747047Negative
B-CDC-Direct2219319111Code 505
T-FCM33330Negative
B-FCM22814Code 505

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; NA, not available; CDC-Direct, Center for Disease Control and Prevention-Direct; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry..



Table 16 . Methods and results of HLA crossmatching in 2020.

TrialsSpecimenMethodsTotal no. of labsQualitative results (no. of labs)Semi-quantitative results (no. of labs)Intended response
NegativePositiveNANegative1:11:21:41:81:161:32>1:32
1stIX-20-01 + IX-20-03T-CDC-Direct43538531115711Positive
T-CDC-AHG450453151872Positive
B-CDC-Direct210211253451Positive
T-FCM31031Positive
B-FCM220202Positive
IX-20-01 + IX-20-04T-CDC-Direct4343043Negative
T-CDC-AHG4545045Negative
B-CDC-Direct21120113124Positive
T-FCM31292Negative
B-FCM220202Positive
IX-20-02 + IX-20-03T-CDC-Direct434211Negative
T-CDC-AHG4538738241Code 505
B-CDC-Direct2112912211311Code 505
T-FCM312110Code 505
B-FCM223181Positive
IX-20-02 + IX-20-04T-CDC-Direct43421421Negative
T-CDC-AHG45441441Negative
B-CDC-Direct21138132123Code 505
T-FCM31310Negative
B-FCM224171Code 505
2ndIX-20-05 + IX-20-07T-CDC-Direct4444044Negative
T-CDC-AHG47461461Negative
B-CDC-Direct211921911Negative
T-FCM33330Negative
B-FCM271881Code 505
IX-20-05 + IX-20-08T-CDC-Direct4441341111Negative
T-CDC-AHG461630163579411Code 505
B-CDC-Direct2111101131132Code 505
T-FCM33132Positive
B-FCM271251Positive
IX-20-06 + IX-20-07T-CDC-Direct4444044Negative
T-CDC-AHG46451451Code 505
B-CDC-Direct21219222384Positive
T-FCM331320Code 505
B-FCM271251Positive
IX-20-06 + IX-20-08T-CDC-Direct4404419171052Positive
T-CDC-AHG460467914124Positive
B-CDC-Direct21021114105Positive
T-FCM33033Positive
B-FCM270261Positive

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; NA, not available; CDC-Direct, Center for Disease Control and Prevention-Direct; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry..



Table 17 . Methods and results of HLA crossmatching in 2021.

TrialsSpecimenMethodsTotal no. of labsQualitative results (no. of labs)Semi-quantitative results (no. of labs)Intended response
NegativePositiveNANegative1:11:21:41:81:161:32>1:32
1stIX-21-01 + IX-21-03T-CDC-Direct4444044Negative
T-CDC-AHG4646046Negative
B-CDC-Direct23203203Negative
T-FCM33330Negative
B-FCM261016Code 505
IX-21-01 + IX-21-04T-CDC-Direct4444044Negative
T-CDC-AHG4646046Negative
B-CDC-Direct23167163121Code 505
T-FCM33330Negative
B-FCM26323Positive
IX-21-02 + IX-21-03T-CDC-Direct444224211Negative
T-CDC-AHG464424411Negative
B-CDC-Direct23122111119Positive
T-FCM33330Negative
B-FCM26125Positive
IX-21-02 + IX-21-04T-CDC-Direct444224211Negative
T-CDC-AHG464424411Negative
B-CDC-Direct2317617321Code 505
T-FCM332112Code 505
B-FCM26125Positive
2ndIX-21-05 + IX-21-07T-CDC-Direct44377371213Code 505
T-CDC-AHG46271927542143Code 505
B-CDC-Direct240241126113Positive
T-FCM33330Positive
B-FCM26026Positive
IX-21-05 + IX-21-08T-CDC-Direct44431431Negative
T-CDC-AHG464424411Negative
B-CDC-Direct2412311124114Positive
T-FCM331617Code 505
B-FCM26026Positive
IX-21-06 + IX-21-07T-CDC-Direct44539555139241Positive
T-CDC-AHG460465696164Positive
B-CDC-Direct240241243122Positive
T-FCM33033Positive
B-FCM26026Positive
IX-21-06 + IX-21-08T-CDC-Direct444224211Negative
T-CDC-AHG46415411121Code 505
B-CDC-Direct24222211123104Positive
T-FCM331914Code 505
B-FCM26026Positive

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; NA, not available; CDC-Direct, Center for Disease Control and Prevention-Direct; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry..



Table 18 . Methods and results of HLA crossmatching in 2022.

TrialsSpecimenMethodsTotal no. of labsQualitative results (no. of labs)Semi-quantitative results (no. of labs)Intended response
NegativePositiveNANegative1:11:21:41:81:161:32>1:32
1stIX-22-01 + IX-22-03T-CDC-Direct43232023158411Code 505
T-CDC-AHG46244226812871Positive
B-CDC-Direct245195444214Code 505
T-FCM33033Positive
B-FCM27027Positive
IX-22-01 + IX-22-04T-CDC-Direct4343043Negative
T-CDC-AHG4646046Negative
B-CDC-Direct242132121Code 505
T-FCM33321Negative
B-FCM2710161Code 505
IX-22-02 + IX-22-03T-CDC-Direct4328152831461Code 505
T-CDC-AHG4693797351264Code 505
B-CDC-Direct2412121242123Code 505
T-FCM33132Positive
B-FCM27027Positive
IX-22-02 + IX-22-04T-CDC-Direct4343043Negative
T-CDC-AHG4646046Negative
B-CDC-Direct24204201111Code 505
T-FCM33330Negative
B-FCM27621Code 505
2ndIX-22-05 + IX-22-07T-CDC-Direct4444044Negative
T-CDC-AHG4646046Negative
B-CDC-Direct25196191122Code 505
T-FCM34286Code 505
B-FCM28622Code 505
IX-22-05 + IX-22-08T-CDC-Direct44431431Negative
T-CDC-AHG46451451Negative
B-CDC-Direct2502523119Positive
T-FCM34340Negative
B-FCM28028Positive
IX-22-06 + IX-22-07T-CDC-Direct4444044Negative
T-CDC-AHG4747047Negative
B-CDC-Direct25205201121Code 505
T-FCM34331Negative
B-FCM28622Code 505
IX-22-06 + IX-22-08T-CDC-Direct44291529812121Code 505
T-CDC-AHG47839861153923Positive
B-CDC-Direct259169153223Code 505
T-FCM34232Positive
B-FCM28028Positive

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; NA, not available; CDC-Direct, Center for Disease Control and Prevention-Direct; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry..



방법 섹션에서 언급한 바대로 2020년부터 새로운 판정기준을 적용하였는데, 이로 인해 code 505를 부여하는 경우가 증가하는 경향을 보였다. 이는 좀 더 민감도가 높은 FCMXM 또는 SABID에서 확인한 DSA 여부를 반영하여 FCMXM에서 10% 이상 그리고 DSA가 50% 초과의 기관에서 양성 보고한 경우에는 각각 Center for Disease Control and Prevention-crossmatching (CDCXM)과 FCMXM 음성 보고 판정 시 code 505를 부여하였기 때문이다. Unacceptable 판정을 받은 오답률은 검사방법이나 phase마다 차이가 있으나 전체적으로는 고르게 분포하였다. CDC 반정량 결과는 양성의 검체의 경우 4개의 희석배수 이상에 걸쳐 넓게 분포하였다. B-FCMXM에서는 검체는 수령하였으나 결과를 보고하지 않은(not available) 기관이 있었다.

주목할 만한 사항은 각 기관별로 교차시험 시행방법이 다양해지고 있는데, FCMXM이 CDCXM법을 대체하거나 증가되는 경향이 있는데, 특히 B세포의 경우 B-FCMXM만을 시행하는 기관들이 B-CDC-Direct를 시행하는 기관 수보다 더 많았다(Table 19).

Table 19 . Different strategies for HLA crossmatching in participating laboratories.

MethodsYear
2019202020212022
T-CDC-Direct + T-CDC-AHG + T-FCM30303030
T-CDC-Direct + T-CDC-AHG15141414
T-CDC-AHG + T-FCM2223
T-FCM111
Total47474748
B-CDC-Direct + B-FCM12151617
B-CDC-Direct10688
B-FCM11121011
Total33333436

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; CDC-Direct, Center for Disease Control and Prevention-Direct; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry..



5. 조직적합성 항체검사(HLA antibody testing)

각 회차당 두 개의 혈청을 배송하여 총 네 개의 물질에 대한 결과를 얻었다. 조직적합성 항체검사는 선별(screening)과 동정(identification) 모두 Immucor Lifecodes사(Stamford, CT, USA)와 One Lambda사(Canoga Park, CA, USA)의 luminex microbead array 기반의 시약을 사용한 SABID법으로 이루어져 왔으나 Immucor Lifecodes사가 2021년부터는 국내 사용이 불가하게 되어 더 이상 사용되고 있지 않고 모든 기관이 One Lambda사의 시약을 사용하고 있다. Table 20Table 21에 모든 항체검사법에 대하여 연도별, 회차별, 그리고 사용시약 정보를 정리하였다.

Table 20 . Kits and results of HLA antibody tests (2019, 2020).

Program/manufacturers/kits20192020
1st2nd1st2nd
IHA-19-01IHA-19-02IHA-19-03IHA-19-04IHA-20-01IHA-20-02IHA-20-03IHA-20-04
PresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsent
Class I screening21212119220111102222
Gen-Probe/Lifecodes LifeScreen Deluxe9942231211
One Lambda/LABScreen Mixed121217171711082121
Class II screening212121211922012222
Gen-Probe/Lifecodes LifeScreen Deluxe99443311
One Lambda/LABScreen Mixed121217171621712121
Class I phenotyping1111108210371010
Gen-Probe/Lifecodes Class I ID77332211
One Lambda/LABScreen PRA Class I4475281799
Class II phenotyping1111889999
Gen-Probe/Lifecodes Class II ID771111
One Lambda/LABScreen PRA Class II44778899
Class I single antigen222202222211832424
Gen-Probe/Lifecodes LSA Class I101066413
One Lambda/LABScreen Single Antigen Class I12210161617172424
Class II single antigen2222222221212424
Gen-Probe/Lifecodes LSA Class II10106644
One Lambda/LABScreen Single Antigen Class II1212161617172424

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses. The instruments were from the following companies: Gen-Probe (San Diego, CA, USA) and One Lambda (Canoga Park, CA, USA)..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 21 . Kits and results of HLA antibody tests (2021, 2022).

Program/manufacturers/kits20212022
1st2nd1st2nd
IHA-21-01IHA-21-02IHA-21-03IHA-21-04IHA-22-01IHA-22-02IHA-22-03IHA-22-04
PresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsentPresentAbsent
Class I screening12122222221212222
Gen-Probe/Lifecodes LifeScreen Deluxe
One Lambda/LABScreen Mixed12122222221212222
Class II screening2222222221212222
Gen-Probe/Lifecodes LifeScreen Deluxe
One Lambda/LABScreen Mixed2222222221212222
Class I phenotyping1010101010101111
Gen-Probe/Lifecodes Class I ID
One Lambda/LABScreen PRA Class I1010101010101111
Class II phenotyping1010101010101111
Gen-Probe/Lifecodes Class II ID
One Lambda/LABScreen PRA Class II1010101010101111
Class I single antigen18624242424242525
Gen-Probe/Lifecodes LSA Class I
One Lambda/LABScreen Single Antigen Class I18624242424242525
Class II single antigen2424242424242525
Gen-Probe/Lifecodes LSA Class II
One Lambda/LABScreen Single Antigen Class II2424242424242525

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses. The instruments were from the following companies: Gen-Probe (San Diego, CA, USA) and One Lambda (Canoga Park, CA, USA)..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



동정검사의 경우에는 여러 개의 항원이 한 비드에 부착되어 있는 시약을 이용한 표현형(phenotyping) 검사와 한 개의 항원이 한 비드에 부착되어 있는 시약을 이용한 단일항원형 동정(single antigen identification) 검사가 모두 시행되고 있는데, 2021년 2차 이후에는 정답률 100%를 보이고 있다(Tables 20, 21).

동정항원별 보고기관 수의 분포를 파악할 수 있는 통계시스템을 도입하였는데, 현재 SABID의 경우 정성결과를 제외하고는 평가 제외 항목으로 판정을 보류하고 있으나, 해당 자료를 통해 consensus에 이르기 어려운 수의 동정항원을 보고한 경우 문제가 있음을 추측할 수 있다(Tables 2225). Percent reactive antibody (PRA) 또는 calculated percent reactive antibodies (cPRA) 값의 보고범위는 여전히 넓었는데, 일부 기관에서 아직도 PRA를 도출하는 방식이 다른 것으로 추정되었다. 2022년도 IHA-22-03 class I의 경우 5%–39% PRA, class II의 경우 8%–68% PRA를 보고하였으며, IHA-22-04 class I의 경우 11%–60% PRA, class II의 경우 45%–99% PRA를 보고하였다.

Table 22 . Distribution of HLA antibodies identified by single antigen-based antibody identification tests in 2019.

VariableHLA antigenNo. of labs
1st
IHA-01
Class ITotal22
A1121
A2621
B721
B821
B2721
B3521
B3721
B4421
B4621
B4721
B5221
B5421
B5521
B5621
B5721
B5821
B5921
B8121
A120
A2920
A3320
A6620
A6820
B1320
B1820
B3820
B4920
B5020
B6320
B6420
B6720
A2519
A3019
A3119
A3419
A4319
B4219
B4519
B5119
B5319
B6219
B6519
B7119
B7319
B7519
B7819
Cw119
A3618
A6918
B4118
B7218
B7618
B7718
Cw418
Cw818
A317
A8017
Cw1517
Cw1216
Cw1416
Cw1616
B3915
B8215
Cw512
Cw612
Cw711
Other7
39015
A325
Cw25
A743
7032
A241
Class IITotal22
DR821
DR1321
DR1719
DR1417
DR1817
Other12
DR14046
DR103
DR122
DR14032
DR531
IHA-02
Class ITotal22
A262
A432
A662
A341
Class IITotal22
DR1222
DR1322
DR1522
DR421
DQ219
DR10315
DR1113
DR1611
DR88
DR516
DR15
DR14035
DR143
Other3
DQ51
2nd
IHA-03
Class ITotal22
Cw822
A121
A221
A321
A1121
A2621
A2921
A3021
A3121
A3221
A3321
A6821
B721
B1321
B2721
B4421
B4821
B5021
B5721
B5821
B6021
B6121
Cw521
A2520
A6920
B4120
B4520
B4720
B8120
A3419
A3619
A4319
A6619
A7419
A8019
B7319
B4918
Cw712
A2034
A234
7032
B632
B672
B381
B391
B641
Cw121
Cw161
Cw21
Other1
Class IITotal22
DR121
DR721
DR1021
DR1521
DR1621
DQ522
DQ421
DQ621
DR920
DR5120
DR10316
Other2
DR81
DR111
DR121
DR141
DR171
DR181
DR521
DQ91
IHA-04
Class ITotal22
B3821
Cw721
B6720
B3917
Cw1217
Cw816
B6415
Cw612
Cw911
B7310
Cw410
Cw169
B638
Cw108
A686
Cw26
B655
39014
A114
Other4
B273
A22
A262
A292
A332
B132
B572
B582
B812
Cw52
A11
A31
A251
A301
A311
A321
A341
A361
A431
A661
A691
A741
A801
B71
B81
B351
B371
B411
B441
B451
B461
B471
B481
B501
B511
B551
B561
B591
B601
B611
B751
Cw141
Cw151
Class IITotal22
DR821
DR1121
DR1221
DR1321
DR1721
DR1821
DR1418
DR5218
DQ517
DR167
DR14033
DR14043
DR42
DQ42
DR11
DR71
DR91
DR101
DR1031
DR151
DR511
DQ21
DQ61
DQ81
DQ91

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 23 . Distribution of HLA antibodies identified by single antigen-based antibody identification tests in 2020.

VariableHLA antigenNo. of labs
1st
IHA-01
Class ITotal21
A2321
A2421
A3221
B721
B1321
B2721
B4421
B4721
B4821
B4921
B5021
B5721
B5821
B6021
B6321
A120
A2520
A8020
B4120
B4520
B6120
B7320
B7620
B8120
Cw219
Cw1518
A2617
A6617
Cw517
A6915
B389
Other5
Cw44
A24032
A332
Cw62
7031
B531
Class IITotal21
DR721
DR821
DR1121
DR1221
DR1321
DR1621
DQ621
DR1420
DR419
DR5118
DR10316
DR5315
Other10
DR177
DR155
DR14032
DR14042
DR182
DR11
DR31
IHA-02
Class ITotal21
B5118
B578
B786
B354
B754
B533
Blank3
B622
B712
B461
B491
B561
Cw21
Cw151
Class IITotal21
DR420
DR820
DR1220
DR5220
DQ420
DQ820
DQ920
DQ218
DQ618
DQ717
DR1714
DR1313
DR119
DR99
Other9
DR148
DR184
DQ54
DR73
DR14032
DR14042
DR31
DQ11
2nd
IHA-03
Class ITotal24
A2324
A2424
B5424
A8023
B5920
B4212
B85
B673
A24031
B551
Class IITotal24
DR124
DR724
DR924
DR1024
DQ224
DQ424
DQ524
DQ624
DQ924
DQ823
DR1423
DR5123
DR422
DR5322
DR10321
DR5211
DQ78
Other7
DR154
DR164
IHA-04
Class ITotal24
A224
A2924
A6824
B824
B6224
B7524
A2623
A3123
A3223
A3323
A3423
B1323
B2723
B3823
B4423
B4623
B4923
B5123
B5723
B5823
B5923
B6323
B6723
B7323
B7623
A2522
A4322
A6622
A6922
A7422
B3722
B4722
B5222
B5322
B7722
Cw722
B4220
B5518
B7214
Other11
B486
A35
Bw42
51021
Class IITotal24
DR124
DR924
DR1024
DR1524
DR1624
DR5124
DQ524
DQ624
DR1223
DR1122
DR10320
DR134
Other4
DR41
DR71
DR81
DR14031
DR531

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 24 . Distribution of HLA antibodies identified by single antigen-based antibody identification tests in 2021.

VariableHLA antigenNo. of labs
1st
IHA-01
Class ITotal24
B4518
Blank6
Class IITotal24
DQ724
DQ824
DQ924
DQ222
DQ622
DQA1*04:0115
DQA1*05:0113
DQA1*03:0211
DQA1*05:0311
DQA1*05:0511
DR129
DQA1*03:019
DQA1*06:019
DQA1*02:017
DQ42
DQA1*01:032
DR71
DR131
DR1031
Other1
IHA-02
Class ITotal24
A2324
A2424
A24031
Class IITotal24
DR924
DR1024
DR5324
DQA1*03:0217
DQA1*03:0317
DR712
DQA1*03:019
DQ28
DQ86
DQ95
DQ43
DQ72
DP61
2nd
IHA-03
Class ITotal24
A2924
B5424
B5724
B5824
B6324
B6724
B723
B2723
B4223
B5523
B5623
B8123
B7322
B8222
B818
Cw516
Cw811
B618
A327
B756
B414
B784
Cw74
A433
B373
Cw153
A332
B352
B532
Cw122
A31
A341
A661
B7CREG (Rodey)1
B391
B511
B621
Class IITotal24
DR724
DR824
DR924
DR1024
DR1124
DR1224
DR1324
DR1424
DQ624
DQ523
DR5222
DQA1*05:0115
DQA1*01:0211
DQA1*01:0110
DQA1*01:039
DQ25
DQ84
DQA1*03:023
DQ92
IHA-04
Class ITotal24
B1824
B5124
A2323
A2523
A3223
B823
B2723
B3523
B3723
B3823
B3923
B4423
B4523
B4623
B4723
B4923
B5023
B5223
B5423
B5523
B5623
B5723
B5823
B5923
B6223
B6323
B6423
B6523
B6723
B7123
B7223
B7523
B7623
A3322
B5322
B7722
B7822
B8222
A2918
B487
Other6
B734
A661
B5CREG (Rodey)1
B8CREG (Rodey)1
B811
Cw71
Class IITotal24
DR824
DR1124
DR1324
DQ224
DQ424
DQ524
DR423
DR1523
DQ623
DQA1*01:0210
DQA1*03:0310
DQA1*04:0110
DQA1*01:019
DQA1*05:019
DQA1*01:038
DQA1*02:014
DR163
DR72
DR511
DP141

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..



Table 25 . Distribution of HLA antibodies identified by single antigen-based antibody identification tests in 2022.

VariableHLA antigenNo. of labs
1st
IHA-01
Class ITotal24
A2424
A2624
A3224
A3324
A6824
B1324
B3524
B3724
B3824
B4424
B4624
B4724
B4924
B5024
B5124
B5224
B5624
B5724
B5824
B5924
B6224
B6324
B7124
B7524
Cw924
Cw1024
A2323
A2523
B2723
B7223
B7623
A3422
B5322
B7722
B7822
A6621
B1821
Other7
A694
Bw41
Cw51
Cw61
Cw121
Cw151
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2nd
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DR181

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..


조직적합성 검사 신빙도조사는 2018년도에 대한진단검사정도관리협회에서 처음으로 도입되어 시행되고 있다. 그간 결과 입력 및 통계와 보고에 사용되고 있는 대한진단검사정도관리협회의 차세대전산시스템도 검사의 결과 양식이나 특성에 따라 개선을 진행하였다.

이번 보고서는 2019년부터 2022까지 4년간의 조직적합성 검사 신빙도조사를 정리한 것으로 각 연도의 결과뿐 아니라 그동안 참여기관 및 항목의 변화를 파악하는 것에도 유용하였다.

HLA typing에서는 NGS법의 도입 및 2020년 요양급여 세부 인정기준(보건복지부 고시 제2020-49호)이 적용됨에 따라 신장, 췌장 및 조혈모세포 이식 대상 환자와 공여자에서 3종 이상 동시 시행 시 NGS법으로의 검사가 시행되게 되었다. 이로 인해 2021년 2차부터 유의하게 NGS법 사용기관이 증가되었고 고해상도 allelic level의 보고도 점차 증가되고 있다. NGS HLA typing의 경우 최소 5 loci에서 최대 11 loci까지 검사가 가능하여 검사 loci도 확대되는 효과가 있었다. 이를 반영하여 2021년부터는 HLA-DPB1에 대한 신빙도조사도 시범사업으로 시행하게 되었다. 2021년 1차에는 3개 기관이 참여하였으나 2022년 2차에는 10개 기관으로 증가하였다. HLA 형을 기술하는 방식은 2010년 개정된 World Health Organization nomenclature 표기법에 따르고 있는데[2,3], 아직도 부적합 판정을 받는 주된 이유 중 하나가 nomenclature를 표기하는 데 있어 오류였다. 또 다른 주요 요인은 입력 시 단순 오기 또는 오류로 결과 입력 시 주의를 기울여야 할 것이며, 더불어 단순오류를 줄이기 위한 입력시스템의 개선방안도 강구되어야 하겠다.

질병 또는 약물 관련 특수 HLA 형별로는 기존의 HLA-B27 이외에 베체트병과 연관성이 알려져 있는 HLA-B51 형별검사가 2020년부터 도입되었다. HLA-B51은 베체트병 위험인자 중 현재까지 알려진 가능성 높은 단일 위험인자로 알려져 있다[4]. 그 중에서도 특히 유의한 연관성을 갖는 allele은 HLA-B*51:01과 –B*51:08인데[5], 한국인에서는 B*51:01이 allele frequency 9.54%로 흔하고 B*51:08은 보고된 바 없어 저해상도로 검사하여도 임상적 의의를 추정하는 데는 문제가 없겠다. 2022년 2차부터는 allopurinol 과민반응과 관련성이 큰 HLA-B*58:01 형별검사를 시범사업으로 시작하였는데, 8개 기관이 참여하였다. 한국인 5,802명을 대상으로 시행된 연구결과에서 B*58:01을 가진 경우 allopurinol 유도 Stevens-Johnson syndrome/toxic epidermal necrolysis 발생위험도가 57.4배(95% 신뢰구간, 7.12–463.50)나 증가함을 보고한 바 있다[6].

HLA 교차시험 평가기준에 대한 개선안이 논의되었고 2020년 관련 전문가 회의를 통해 새로운 판정기준이 도입되었다. 이는 좀 더 민감도가 높은 FCMXM 및 SABID 검사를 통해 HLA 항체 유무를 객관적으로 판별할 수 있으므로 다수의 기관에서 음성을 보고하더라도 더 예민한 검사에서 양성을 보이는 경우 해석 및 판정의 오류를 피하기 위하여 음성 consensus 수준을 90% 올리고 만약 FCMXM에서 양성 및 SABID를 통한 DSA가 일정 수준 이상 있는 경우에는 판정 제외, 즉 code 505를 부여하기로 하였다. 불합리한 부적합 결과 판정은 줄일 수 있으나 실제 code 505의 빈도는 증가하여 결과를 받은 기관들에서 그 의미를 잘 해석하고 적용할 필요가 있다.

FCMXM에서는 여전히 기관 간 consensus를 이루지 못하여 code 505가 부여되는 경우가 많은데, 기관별 차이를 줄이고 방법을 표준화하기 위한 노력들이 이루어져 왔다[7-9]. 대한진단검사정도관리협회 학술연구과제로 2019년에는 FCMXM 방법을 제안하고 다기관 검증을 시도하였고[8], 2021년에는 해당 방법을 사용하여 cut-off를 확립하고자 다기관 연구를 시행하였다[9]. 연구에서 도출된 방법이나 cut-off를 국내 모든 기관에 적용하기는 현실적으로 쉽지 않으나 다기관 연구를 통해서 그 가능성을 확인하였다. 현재까지 신빙도조사에서 FCMXM 결과의 분포를 볼 때 지속적인 기관 간 일치 및 표준화를 위한 노력이 있어야 하겠다.

HLA 항체 선별 및 동정검사는 Immucor Lifecodes사와 One Lambda사의 비드 기반 시약이 사용되어 왔으나 2021년부터는 Immucor Lifecodes사의 시약이 허가상의 문제로 국내 사용이 불가하게 됨에 따라 모든 기관이 One Lambda사의 시약을 사용하고 있다. 실제 비교할 수 있는 시약이 없으므로 항체 유무 결과 및 동정된 항체들의 종류나 양상의 적절성을 판별할 수 있는 절대적 기준은 없다. 단지 기관 간 항체 동정 시 판정기준을 일치시키고자 한다면 하나의 기회가 될 것이라고 생각하며, 그런 의미에서 각 기관에서 보고하는 항체 종류나 양상을 객관적으로 비교하는 것이 중요하다. 동정항원별 보고기관 수의 분포를 파악할 수 있는 통계시스템을 도입하였고 이를 분석하여 본 보고서에 기술하였는데, 해당 자료를 통해 consensus에 이르기 어려운 기관 수의 동정항원을 보고한 경우 문제가 있음을 추측할 수 있다 현재는 SABID의 경우 보고한 동정항원들에 대해서는 적합성 판정기준이 없는 상황이나 추후 판정기준 수립을 위한 기본 자료로 활용할 수 있을 것이다.

현재 신빙도조사 프로그램은 관리자 및 물질제조자를 각각 따로 또는 한 기관에서 두 가지 모두를 담당하는 전문가가 수행하고 있다. 저자는 대한진단검사의학회 정도관리분과에서 3년, 대한진단검사정도관리협회에서 5년간 조직적합성 검사 신빙도 프로그램을 운영하였는데, 새로운 검사법 및 프로그램 운영체계의 발전이 지속적으로 이루어져 왔지만, 여전히 과학적이고 체계적인 운용을 위한 배경지식, 기술, 안정적인 물적, 인적 지원이 필요하다고 생각한다. 또한 지속적이고도 실질적인 교육 및 연구를 통해 전반적인 검사의 질 개선과 발전이 이루어져야 할 것으로 생각한다.

정도관리물질의 제조에 도움을 주신 박준우 병리사와 삼성서울병원 진단면역검사실 병리사들, 헌혈실 정혜경, 김혜미 간호사, 정미정 연구원 그리고 헌혈 공여자 처치에 참여해준 전공의들에게 감사의 뜻을 전합니다. 그리고 무엇보다 정도관리물질을 제공하기 위하여 공여자로 참여해준 많은 직원들 및 환자들에게 깊은 감사의 뜻을 전한다.

  1. Kang ES. Annual report of Korean Association of External Quality Assessment Service on histocompatibility testing (2018). J Lab Med Qual Assur 2019;41:130-52.
    CrossRef
  2. Marsh SG, Albert ED, Bodmer WF, Bontrop RE, Dupont B, Erlich HA, et al. Nomenclature for factors of the HLA system, 2010. Tissue Antigens 2010;75:291-455.
    Pubmed KoreaMed CrossRef
  3. Lee KW, Park MH. New HLA nomenclature (2010) and its clinical application in Koreans. Korean J Lab Med 2010;30:203-17.
    Pubmed CrossRef
  4. Wallace GR. HLA-B*51 the primary risk in Behcet disease. Proc Natl Acad Sci U S A 2014;111:8706-7.
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  5. Elfishawi M, Mossallam G, Augusto DG, Montero-Martin G, de Bruin H, Van de Pasch L, et al. Behcet disease, new insights in disease associations and manifestations: a next-generation sequencing study. Clin Exp Immunol 2021;204:144-51.
    Pubmed KoreaMed CrossRef
  6. Park HJ, Kim YJ, Kim DH, Kim J, Park KH, Park JW, et al. HLA allele frequencies in 5802 Koreans: varied allele types associated with SJS/TEN according to culprit drugs. Yonsei Med J 2016;57:118-26.
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  7. Yu S, Kang ES, Park MH. A questionnaire survey of HLA crossmatch tests in Korea (2015). Lab Med Online:147-56.
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  8. Park Y, Park MH, Park BG, Oh EJ, Bang HI, Lee JH, et al. Multicenter verification of a harmonized test method for human leukocyte antigen flow cytometry crossmatching. J Lab Med Qual Assur 2021;43:152-61.
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  9. Bang HI, Park Y, Song EY, Oh EJ, Lee JH, Kang ES. Feasibility of establishing a common cut-off of human leukocyte antigen flow cytometry crossmatch using harmonized protocols in a multicenter setting. Lab Med Qual Assur 2022;44:204-11.
    CrossRef

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