Report of Korean Association of External Quality Assessment Service on Histocompatibility Testing (2019–2022)

Eun-Suk Kang; Jong Kwon Lee

doi:10.15263/jlmqa.2024.46.1.1

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Report On Proficiency Testing

Lab Med Qual Assur 2024; 46(1): 1-37

Published online March 31, 2024

https://doi.org/10.15263/jlmqa.2024.46.1.1

Report of Korean Association of External Quality Assessment Service on Histocompatibility Testing (2019–2022)

Eun-Suk Kang^* and Jong Kwon Lee^*

Department of Laboratory Medicine and Genetics, Samsung Medical Center, Sungkyunkwan University School of Medicine, Seoul, Korea

Correspondence to:Eun-Suk Kang
Department of Laboratory Medicine and Genetics, Samsung Medical Center, Sungkyunkwan University School of Medicine, 81 Irwon-ro, Gangnam-gu, Seoul 06351, Korea
Tel +82-2-3410-2703
E-mail eskang@skku.edu

*These authors contributed equally to this work as the first author.

This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.

Abstract

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Abstract
서론
재료 및 방법
결과
고찰
감사의 글
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Here, we report the results of the histocompatibility proficiency testing performed by the Korean Association of External Quality Assessment Service from 2019 to 2022. The HLA-B51 and HLA-DPB1 typing programs were adopted in 2020 and 2021, respectively. The HLA-B*58:01 typing program was commenced from the second trial in 2022 as a demonstration program. The directly prepared proficiency testing specimens of whole blood, sera, and mononuclear cell suspensions were distributed to participants biannually. The enrollment of participants was expanded for high-resolution human leukocyte antigen (HLA) typing, B cell flow cytometry crossmatching (B-FCMXM), and single antigen bead antibody identification (SABID) tests. The phase and method combination for HLA crossmatching demonstrated variability in terms of laboratory results, and the grading criteria were revised in 2020. The response rate was 100% except that for B-FCMXM. The accuracy rates were generally very high; however, frequent input or nomenclature errors for HLA typing results and frequent non-consensus (code 505) and wide distribution of semiquantitative Center for Disease Control and Prevention results between laboratories were noted. The statistical analysis of reported HLA antibodies rendered the determination of unacceptable responses easier than earlier methods; however, the absence of consensus criteria meant that the responses were not graded yet. Continuous efforts to improve the proficiency programs and the education for standardization between laboratories are mandatory.

Keywords: Histocompatibility, Laboratory proficiency testing, Korean Association of External Quality Assessment Service

서론

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조직적합성(histocompatibility) 검사는 성공적인 이식을 위해서는 필수적인 검사이다. 조직적합성항원(human leukocyte antigen, HLA) 또는 주조직복합체(major histocompatibility complex) 형별검사(HLA typing)는 장기 및 조혈모세포 이식 전 최적의 공여자를 선별하고, HLA 교차시험(HLA crossmatching) 및 HLA 항체검사(HLA antibody identification)를 통해 부적합 공여자를 배제하고 이식 후 경과를 예측하는 데 중요한 정보를 제공한다. 일부 특정 HLA 형은 질병연관성이 높아 특정 질병을 진단하는 것에 이용된다. 특히 국내에서 이식을 위한 타인 공여자의 매칭은 질병관리본부 장기이식관리센터(Korean Network for Organ Sharing)의 중앙화된 정보시스템을 통해 이루어지고 있어 여러 다른 기관에서 이루어진 검사결과를 바탕으로 선정하게 된다. 그러므로 기관 간 HLA 검사의 표준화와 호환성은 매우 중요하다.

대한진단검사정도관리협회(‘대한임상검사정도관리협회’에서 변경)에서는 2000년부터 대한진단검사의학회 정도관리분과 사업으로 시행되어 온 조직적합성 검사 외부정도관리 프로그램을 2018년부터 대체하여 시행해 오고 있다. 첫해인 2018년의 신빙도조사 결과는 2019년도에 보고한 바 있다[1].

본 보고에서는 2019년부터 2022년까지 시행된 조직적합성 검사 신빙도조사 결과를 정리하고 그간의 유의한 변화와 향후 전망을 제시하고자 하였다.

재료 및 방법

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재료 및 방법
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1. 조사항목

조직적합성 검사 프로그램은 연 2회에 걸쳐 고해상도 및 저해상도 HLA typing, HLA B27 typing, HLA crossmatching 그리고 HLA antibody screening, phenotyping과 identification 항목과 더불어 2020년부터는 HLA B51 typing 그리고 2022년 2차부터는 HLA B*58:01 typing이 시행되었다. 신선한 세포로 배송되어야 하는 특성상 당일 혹은 익일에 검체가 전달되도록 신속 예약배송시스템을 활용하였고, 실온상태에서 세포 신선도를 보증하기 위하여 외부 기온이 높지 않은 4월 첫째 주와 10월 둘째 주 월요일에 발송하였다.

2. 외부신빙도조사용 정도관리물질

검체의 제조는 자가제조물질 개발 용역연구를 맡은 삼성서울병원에서 수행하였다. 검체 제조를 위한 혈액을 확보하기 위하여 연구윤리위원회(institutional review board)의 심의를 얻었으며 공지문을 통해 자원자를 모집하였다. 자원자는 혈액공여자 선별기준에 따라 적합성을 확인하였다. 자가 제조된 물질은 분주 및 라벨링을 마친 후 대한진단검사정도관리협회로 즉시 운반되어 포장된 후 각 참여기관으로 당일 발송되었다. 국내 특급우편을 이용하여 혈청은 냉장, 세포는 실온상태에서 배송되었으며 발송 후 24–48시간 내에 검사실에 도착될 수 있도록 하였다. 제주도의 경우에는 항공우편을 이용하여 72시간 내에 도착될 수 있도록 하였다.

1) HLA typing 전혈 제조

자원자들에서 미리 HLA typing을 시행하여 교차시험에서 활용할 수 있는 HLA 형별 대상자를 확보하였다. 발송 당일 선별한 자원자들로부터 ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) 전혈을 채집한 후 시험관당 1 mL씩 즉시 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

2) HLA-B27, -B51, -B*58:01 typing 전혈 제조

자원자들에서 미리 HLA typing을 시행하여 HLA-B27, -B51 그리고 –B*58:01 양성과 음성 대상자를 확보하였다. 발송 당일 선별한 자원자들로부터 EDTA 전혈을 채집한 후 각 시험관당 1 mL씩 즉시 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

3) HLA crossmatching용 단핵구 부유액 제조

교차시험에서 적절한 반응을 보이는 HLA 형을 가진 자원자로부터 발송 당일 혈액분반술을 통해 필요한 수의 단핵구를 채집하였다. 채집 즉시 0.5–1×107/mL의 농도가 되도록 자가혈장으로 희석한 후 시험관당 1 mL씩 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

4) HLA crossmatching 및 antibody test용 혈청 제조

신장이식 대기 중 단일항원기반항체동정(single antigen bead identification, SABID) 검사를 통해 항원 특이성이 밝혀진 환자로부터 서면동의서를 획득한 후 약 100 mL의 전혈을 채집하였다. 채집 전 담당 임상의로부터 환자 상태에 대한 자문을 구하였으며, 상태에 따라 한번에 100 mL 또는 2차에 나누어 총 100 mL를 채집하였다. 채집은 헌혈실에서 간호사의 채혈 및 담당의사의 관찰하에 진행하였다. 약 2시간 방치하여 충분한 혈액응고가 진행된 후 3,000 rpm에서 15분간 원심분리한 후 혈청을 회수하였다. 혈청은 20 µm 필터를 사용하여 처리 후 영하 70도에 냉동 보관하였다. 발송 당일 해동하여 다시 한번 원심분리한 후 상층액을 시험관당 약 500 µL씩 분주하였다. 회차당 각각 2개씩의 검체를 제조하였다.

3. 결과 판정 및 분석

결과는 차세대신빙도사업 홈페이지에 입력하도록 하였고, 입력기간은 발송 후 10일에 종료하였다. 이후 입력결과에 대한 데이터 오류를 검증한 후 통계분석을 시행하였다.

모든 항목은 정성검사에 준하여 판정하였으며 기대결과(intended response)는 신뢰할 만한 정답이 있는 경우와 그렇지 않은 경우에는 보고한 기관에서 80% 이상의 일치를 보이는 결과로 하였다. 단, HLA crossmatching의 경우 민감도가 다른 두 가지 이상의 검사법을 반드시 시행하도록 권고하고 있는 바 민감도가 높은 검사에서 80% 이상의 일치를 보이지 않는 경우 하위 검사의 결과는 ‘code 505’로 기술하고 판정 제외하였는데, 2020년에 전문가 회의를 통해 판정기준을 개정하였다. 새로운 판정기준에서는 민감도가 높은 유세포교차시험(flow cytometry crossmatching, FCMXM) 결과의 negative consensus의 기준을 90%로 높였고, FCMXM 결과 판정 시에는 시험에 사용한 혈청이 세포에 대한 공여자 특이항체(donor-specific antibodies, DSAs)를 가지고 있는 경우 역시 negative consensus의 기준을 90%로 높여 판정에 반영하였다(Table 1).

Table 1 . 2020 Revised grading criteria for human leukocyte antigen crossmatching test.

Category	Crossmatching methods	Grades for negative response	Grades for positive response
CDC
1	CDC consensus positive (80%)	Unacceptable	Acceptable
2	CDC consensus negative (90%) and FCM negative consensus	Acceptable	Unacceptable
3	CDC consensus negative (90%) and FCM positive (≥10%)	Acceptable	Code 505
4	No consensus	Code 505	Code 505
FCM
A	FCM consensus positive (80%)	Unacceptable	Acceptable
B	FCM consensus negative (90%) and DSA negative	Acceptable	Unacceptable
C	FCM consensus negative (90%) and DSA positive (>50%)	Acceptable	Code 505
D	No consensus	Code 505	Code 505

Abbreviations: CDC, complement dependent cytotoxicity; FCM, flow cytometry; Code 505, not graded; DSA, donor-specific antibody..

HLA crossmatching의 반정량 결과와 HLA 항체 항원성 동정 결과는 별도로 판정기준을 부여하지 않았다.

결과

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재료 및 방법
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1. 신빙도조사사업 참여기관 및 항목 현황

Table 2에 2019년부터 2022년 사이 각 항목에 참여한 기관들의 수를 정리하였다. HLA typing 검사의 경우 유전형(generic type)과 대립유전자형(allelic type) 그리고 혈청형(serological equivalent)을 보고하도록 하고 있는데, 매년 대립유전자형 보고 기관이 증가하는 것을 알 수 있다. HLA crossmatching의 경우는 B세포 FCMXM (B-FCMXM) 시행기관이 증가양상을 보였다. HLA antibody 검사의 경우 phenotyping 검사를 시행하고 있는 기관은 지속적으로 약 10기관으로 유지되고 있으며, SABID 시행기관은 2020년 2차부터 증가하는 경향이 관찰되면서 선별검사(screening) 기관보다 더 많았다. 질병 혹은 약물반응 관련 HLA 형별검사는 HLA-B27에 더하여 2019년부터는 HLA-B51, 그리고 2022년 2차부터는 HLA-B*58:01 외부정도관리 프로그램을 도입하였다. 각 항목별로 회신율은 B-FCMXM을 제외하고는 100%였는데, B-FCMXM의 경우 검체 혹은 방법상의 문제로 결과를 보고하지 못하는 기관이 지속적으로 관찰되었다(Table 2).

Table 2 . Laboratories participating in histocompatibility program from 2019 to 2022.

Test items	No. of labs
	2019		2020		2021		2022
	1st	2nd	1st	2nd	1st	2nd	1st	2nd
HLA typing*
Generic type	65	65	66	67	66	67	65	65
Allelic type	25	26	28	28	28	31	32	29
HLA crossmatching
T-CDC-Direct	45	45	43	44	44	44	43	44
T-CDC-AHG	47	47	45	47	46	46	46	46
B-CDC-Direct	22	22	21	21	23	24	24	25
T-FCMXM	33	33	31	33	33	33	33	34
B-FCMXM†	23 (1)	23	22 (2)	27 (1)	26	26	27 (1)	28
HLA antibody
Screening	21	21	21	22	22	21	21	22
Phenotyping	11	10	10	10	10	10	10	11
Single antigen identification	22	22	21	24	24	24	24	25
HLA genotyping
HLA B27 typing	61	61	60	61	60	61	63	63
HLA B51 typing	28	28	28	29	29	30	30	30
HLA B58:01 typing	-	-	-	-	-	-	-	8

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

*The number of labs estimated according to the test for HLA-A/B/DRB1 loci. †The numbers in parenthesis indicate the labs that did not respond..

2. 조직적합성 형별검사(HLA typing)

참여한 모든 기관이 DNA를 사용하여 polymerase chain reaction (PCR)에 기반한 방법을 사용하여 결과를 보고하였다. 보고기간에 검사에 사용한 시약 및 제조사에 미미한 변화가 있었으나 가장 주목할 만한 변화는 2021년 2차부터 차세대염기서열 기반(next generation sequence, NGS) 형별검사가 유의하여 증가하였다는 것이다(HLA-A 기준 7기관에서 11기관). 저해상도 형별검사의 경우 sequence specific oligonucleotide probe reverse와 sequence specific primers가 고르게 사용되는 방법이었다. 단지 저해상도 검사의 경우 현재 정도관리 입력시스템상 국내 기관들에서 사용하는 시약을 중복하여 모두 입력하고 있지는 않아서 정확한 시약 사용현황을 파악하기 어려운 문제점이 있다. Table 3에 2022년 검사법 및 사용 시약들에 대해 정리하였다(Table 3). Fig. 1은 2019년 이후 각 회차별 각 유전자좌(loci)에 대하여 generic type과 allelic type을 보고한 기관들의 수를 표시하였다. 아직도 HLA-C와 HLA-DPB1 검사를 시행 및 보고하는 기관의 수는 HLA-A, B, DR, DQB1 loci에 비해 적으나 전반적으로 allelic type을 보고하는 기관이 증가 추세임을 볼 수 있다(Fig. 1).

Table 3 . HLA typing methods and frequently used kits.

Methods/kits	2022
	1st						2nd
	HLA-A	HLA-B	HLA-C	HLA-DR	HLA-DQ	HLA-DP	HLA-A	HLA-B	HLA-C	HLA-DR	HLA-DQ	HLA-DP
PCR-SSP	23	23	13	23	13	0	24	24	14	24	14	0
Micro SSP Generic Trays, One Lambda
HLA PCR/SSP Kit, Biosewoom
PCR-SSOP	28	28	13	28	23	1	27	27	12	27	22	1
LABType SSO, One Lambda
INNO LiPA HLA kit, Fujirebio
SBT	16	16	16	16	9	1	15	15	14	15	9	1
SeCore SBT kit, One Lambda
Allele SEQR HLA, GenDx
AVITA cross HLA SBT kit, BIOWITHUS
AVITA plus HLA SBT kit, BIOWITHUS
AVITA HLA SBT kit, BIOWITHUS
NGS	12	12	11	12	10	6	13	13	12	13	12	8
NGSgo HLA-NGS (6 loci), GenDx
AllType NGS (11 loci), One Lambda
Others	4	4	4	4	4	1	2	2	2	2	1	1
Total	83	83	57	83	59	9	81	81	54	81	58	11

The use of LIFECODES HLA SSO typing kit was stopped since 2021. The instruments were from the following companies: One Lambda (Canoga Park, CA, USA), Biosewoom (Seoul, Korea), Fujirebio Inc. (Tokyo, Japan), GenDx (Utrecht, The Netherlands), and Biowithus Inc. (Seoul, Korea)..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; PCR, polymerase chain reaction; SSP, sequence specific primers; SSOP, sequence specific oligonucleotide probe; SBT, sequence-based typing; NGS, next generation sequence..

Figure 1. Distribution of laboratories reporting human leukocyte antigen (HLA) generic type and allelic type according to HLA loci during the trials from 2019 to 2021.

각 회차별 보고된 결과들을 Tables 4–11에 정리하였다. 실제 잘못된 형을 보고한 기관은 2019년도에 약 1.5%에 해당하였으며, 그 이후 unacceptable로 분류된 경우는 대부분 입력 시 오류 또는 용어(nomenclature) 표기오류에 해당하였다(Tables 4–11).

Table 4 . Results of HLA class I typing in 2019.

Trials	Specimen	Resolution	HLA-A	No. of labs	HLA-B	No. of labs	HLA-C	No. of labs
1st	IHL-19-01	Generic type	A02/A24	65	B55/B59	65	*C01**	1
							C*01/Blank	38
		Allelic type	A02:06/A24:02	20	B55:02/B59:01	20	C01:02/C01:02	5
			A02:06G/A24:02G	5	B55:02G/B59:01G	5	C01:02/C99:99	15
							C01:02G/C01:02G	2
							C01:02G/C99:99	3
		Serological equivalent	A2/A24	64	B55/B59	64	Cw1	1
							Cw1/Blank	39
	IHL-19-02	Generic type	A24/A33	65	B44/B59	65	C01/C07	39
		Allelic type	A24:02/A33:03	19	B44:03/B59:01	20	*C01:02/C07:01*	1
			A24:02/A33:03G	1	B44:03/B59:01G	4	*C01:02/C07:01G*	4
			A24:02G/A33:03G	5	B44:03G/B59:01G	1	C01:02/C07:06	15
							*C01:02G/C07:01G*	4
							C01:02G/C07:06	1
		Serological equivalent	A24/A33	64	B44/B59	64	Cw1/Cw7	40
2nd	IHL-19-03	Generic type	A02/A33	65	B44/B48	65	C08/C14	38
		Allelic type	A02:06/A33:03	21	B44:03/B48:01	22	C08:03/C14:03	24
			A02:06/A33:03G	1	B44:03G/B48:01G	4	C08:03G/C14:03G	1
			A02:06G/A33:03G	4
		Serological equivalent	A2/A33	65	B44/B48	65	Cw8/Blank	33
							Cw8/Cw1	1
							Cw8/Cw14	6
	IHL-19-04	Generic type	A24/A30	65	B13/B51	65	C06/C14	38
		Allelic type	A24:02/A30:01	22	B13:02/B51:01	22	C06:02/C14:02	21
			A24:02G/A30:01G	4	B13:02G/B51:01G	4	C06:02G/C14:02G	4
		Serological equivalent	A24/A30	65	B13/B51	65	Cw6/Blank	33
							Cw6/Cw1	1
							Cw6/Cw14	6

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 5 . Results of HLA class II typing in 2019.

Trial	Specimen	Resolution	HLA-DR	No. of labs	HLA-DQ	No. of labs
1st	IHL-19-01	Generic type	DRB111/DRB114	65	DQB103/DQB105	36
		Allelic type	DRB111:01/DRB114:05	21	DQB103:01/DQB105:03	8
			DRB111:01G/DRB114:05	1
			DRB111:01G/DRB114:05G	3
		Serological equivalent	DR11/DR14	64	DQ7/DQ5	36
	IHL-19-02	Generic type	*DRB104/DRB105*	1	DQB102/DQB104	36
			DRB104/DRB107	64
		Allelic type	DRB104:05/DRB107:01	22	DQB102:02/DQB104:01	12
			DRB104:05G/DRB107:01G	3	DQB102:02G/DQB104:01G	1
		Serological equivalent	DR4/DR5	1	DQ2/DQ4	36
			DR4/DR7	63
2nd	IHL-19-03	Generic type	DRB113/DRB115	65	DQB103/DQB106	41
		Allelic type	*DRB113:01/DRB115:02*	1	DQB103:01/DQB106:04	14
			DRB113:02/DRB115:01	20	DQB103:01G/DQB106:04G	1
			DRB113:02/DRB115:01G	1
			DRB113:02G/DRB115:01G	4
		Serological equivalent	DR13/DR15	65	DQ6/DQ7	44
	IHL-19-04	Generic type	DRB107/DRB111	65	DQB102/DQB103	41
		Allelic type	DRB107:01/DRB111:01	21	DQB102:02/DQB103:02	14
			DRB107:01G/DRB111:01	1	DQB102:02G/DQB103:02G	1
			DRB107:01G/DRB111:01G	4
		Serological equivalent	DR7/DR11	65	DQ2/DQ8	42

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 6 . Results of HLA class I typing in 2020.

Trials	Specimen	Resolution	HLA-A	No. of labs	HLA-B	No. of labs	HLA-C	No. of labs
1st	IHL-20-01	Generic type	A02/A24	66	B40/B51	66	C03/C14	40
		Allelic type	A02:01/A24:02	25	B40:02/B51:01	25	C03:03/C14:02	24
			A02:01G/A24:02G	3	B51:01G/B40:02G	3	C03:03G/C14:02G	3
		Serological equivalent	A2/A24	66	B51/B61	66	Cw1/Cw9	1
							Cw3/Blank	2
							Cw9/Blank	33
							Cw9/Cw1/Blank	1
							Cw9/Cw14	4
	IHL-20-02	Generic type	A02/A33	66	B44/B59	66	C01/C14	40
		Allelic type	A02:06/A33:03	24	B44:03/B59:01	25	C01:02/C14:03	24
			A02:06/A33:03G	1	B44:03G/B59:01G	3	C01:02G/C14:03	1
			A02:06G/A33:03G	3			C01:02G/C14:03G	2
		Serological equivalent	A2/A33	66	B44/B59	66	Cw1/Blank	37
							Cw1/Cw14	4
2nd	IHL-20-03	Generic type	A26/A33	67	B15/B46/	67	C01/C03	39
		Allelic type	A26:02/A33:03	24	B15:01/B46:01	25	C01:02/C03:03	24
			A26:02/A33:03G	4	B46:01G/B15:01G	3	C01:02G/C03:03G	3
		Serological equivalent	A26/A33	67	B46/B62	67	Cw1/Cw9	40
	IHL-20-04	Generic type	A01/A02	67	*B54**	3	*C01**	1
					B*54/Blank	64	C*01/Blank	39
		Allelic type	A01:01/A02:01	25	B54:01/B54:01	4	C01:02/C01:02	4
			A01:01G/A02:01G	3	B54:01/B99:99	21	C01:02/C99:99	20
					B54:01G/B54:01G	1	C01:02G/C01:02G	1
					B54:01G/B99:99	2	C01:02G/C99:99	2
		Serological equivalent	A1/A2	67	B54	3	Cw1	1
					B54/Blank	64	Cw1/Blank	39

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 7 . Results of HLA class II typing in 2020.

Trials	Specimen	Resolution	HLA-DR	No. of labs	HLA-DQ	No. of labs
1st	IHL-20-01	Generic type	*DRB114**	1	DQB103/DQB105	45
			DRB1*14/Blank	65
		Allelic type	DRB114:03/DRB114:05	25	DQB103:01/DQB105:03	16
			DRB114:05G/DRB114:03	3	DQB105:03G/DQB103:01G	1
		Serological equivalent	DR14/Blank	22	DQ5/DQ7	45
			DR14/DR1403	44
	IHL-20-02	Generic type	DRB104/DRB113	66	DQB104/DQB106	45
		Allelic type	DRB104:05/DRB113:02	25	DQB104:01/DQB106:04	16
			DRB104:05G/DRB113:02G	3	DQB104:01G/DQB106:04G	1
		Serological equivalent	DR4/DR13	66	DQ4/DQ6	45
2nd	IHL-20-03	Generic type	*DRB114**	3	*DQB103**	2
			DRB1*14/Blank	64	DQB1*03/Blank	45
		Allelic type	DRB114:06/DRB114:06	4	DQB103:01/DQB103:01	2
			DRB114:06/DRB199:99	24	DQB103:01/DQB199:99	14
					DQB103:01G/DQB103:01G	2
		Serological equivalent	DR14	3	DQ7	2
			DR14/Blank	64	DQ7/Blank	45
	IHL-20-04	Generic type	DRB104/DRB108	67	DQB104/DQB106	47
		Allelic type	DRB104:05/DRB108:03	25	DQB104:01/DQB106:01	16
			DRB104:05G/DRB108:03G	3	DQB104:01/DQB106:01G	2
		Serological equivalent	DR4/DR8	67	DQ4/DQ6	47

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 8 . Results of HLA class I typing in 2021.

Trials	Specimen	Resolution	HLA-A	No. of labs	HLA-B	No. of labs	HLA-C	No. of labs
1st	IHL-21-01	Generic type	A31/A33	66	B35/B44	66	C03/C14	38
		Allelic type	A31:01/A33:03	24	B35:01/B44:03	25	C03:03/C14:03	24
			A31:01/A33:03G	4	B35:01G/B44:03G	3	C03:03G/C14:03G	3
		Serological equivalent	A31/A33	65	B35/B44	65	Cw9/Blank	34
							Cw9/Cw1	1
							Cw9/Cw14	3
	IHL-21-02	Generic type	A*02/Blank	66	B35/B40	66	C04/C08	38
		Allelic type	A24:02/A24:02	2	B35:01/B40:06	25	C04:01/C08:01	24
			A24:02/A99:99	23	B35:01G/B40:06G	3	C04:01G/C08:01G	3
			A24:02G/A24:02G	3
		Serological equivalent	A2/Blank	1	B35/B61	65	Cw4/Cw8	38
			A24/Blank	64
2nd	IHL-21-03	Generic type	A02/A24	67	B07/B37	67	C06/C07	39
		Allelic type	*A02:01/A24:01*	1	B07:02/B37:01	28	C06:02/C07:02	26
			A02:01/A24:02	27	B07:02G/B37:01G	3	C06:02G/C07:02G	3
			A02:01G/A24:02G	3
		Serological equivalent	A2/A24	65	B7/B37	65	Cw6/Cw7	38
	IHL-21-04	Generic type	A02/A33	67	B54/B55	67	C*01/Blank	39
		Allelic type	A02:01/A33:03	27	B54:01/B55:02	28	C01:02/C01:02	3
			A02:01/A33:03G	1	B54:01G/B55:02G	3	C01:02/C99:99	23
			A02:01G/A33:03G	3			C01:02G/C01:02G	2
							C01:02G/C99:99	1
		Serological equivalent	A2/A33	65	B54/B55	65	Cw1/Blank	38

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 9 . Results of HLA class II typing in 2021.

Trials	Specimen	Resolution	HLA-DR	No. of labs	HLA-DQ	No. of labs	DP	No. of labs
1st	IHL-21-01	Generic type	DRB104/DRB113	66	DQB104/DQB106	47	*DPB12/DPB13*	3
		Allelic type	DRB104:10/DRB113:02	25	DQB104:02/DQB106:04	16
			DRB104:10G/DRB113:02G	3	DQB104:02G/DQB106:04G	1
		Serological equivalent	DR4/DR13	65	DQ4/DQ6	46	DPB102:01/DPB103:01	3
	IHL-21-02	Generic type	DRB109/DRB111	66	DQB1*03/Blank	47	*DPB13/DPB14*	3
		Allelic type	DRB109:01/DRB111:01	25	DQB103:01/DQB103:03	16	DPB103:01/DPB104:02	3
			DRB109:01G/DRB111:01G	3	DQB103:01G/DQB103:03G	1
		Serological equivalent	DR9/DR11	65	DQ7/DQ9	46
2nd	IHL-21-03	Generic type	DRB101/DRB110	67	DQB1*05/Blank	48	DPB103/DPB104	7
		Allelic type	DRB101:01/DRB110:01	28	DQB105:01/DQB105:01	2	DPB103:01/DPB104:02	7
			DRB101:01G/DRB110:01G	3	DQB105:01/DQB199:99	18
					DQB105:01G/DQB105:01G	1
		Serological equivalent	DR1/DR10	65	Blank	1
					DQ5/Blank	46
	IHL-21-04	Generic type	DRB109/DRB115	67	DQB103/DQB106	48	*DPB105**	1
							DPB1*05/Blank	6
		Allelic type	DRB109:01/DRB115:01	28	DQB103:03/DQB106:02	20	DPB105:01/DPB105:01	1
			DRB109:01G/DRB115:01G	3	DQB103:03G/DQB106:02G	1	DPB105:01/DPB199:99	6
		Serological equivalent	DR9/DR15	65	DQ6/DQ9	47

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 10 . Results of HLA class I typing in 2022.

Trials	Specimen	Resolution	HLA-A	No. of labs	HLA-B	No. of labs	HLA-C	No. of labs
1st	IHL-22-01	Generic type	A01/A11	65	B37/B40	65	C03/C06	39
		Allelic type	A01:01/A11:01	30	B37:01/B40:01	30	C03:04/C06:02	30
			A01:01G/A11:01G	2	B37:01G/B40:01G	2	C06:02G/C03:04G	2
		Serological equivalent	A1/A11	65	B37/B60	65	Cw10/Cw6	40
	IHL-22-02	Generic type	A02/A24	65	B15/B48	65	C03/C04	39
		Allelic type	A02:06/A24:02	30	B15:01/B48:01	30	C03:04/C04:01	28
			A02:06G/A24:02G	2	B48:01G/B15:01G	2	C04:01G/C03:04G	2
		Serological equivalent	A2/A24	65	B48/B62	65	Cw10/Cw4	40
2nd	IHL-19-03	Generic type	A01/A02	65	B54/B55	2	C*01/Blank	39
					B*54/Blank	63
		Allelic type	A01:01/A02:01	28	B54:01/B54:01	3	C01:02/C01:02	2
			A01:01G/A02:01G	1	B54:01/B99:99	25	C01:02/C99:99	25
					B54:01G/B99:99	1
		Serological equivalent	A1/A2	65	B54/Blank	65	Cw1/Blank	40
	IHL-19-04	Generic type	A*33/Blank	65	B*44/Blank	65	C*14/Blank	39
		Allelic type	A33:03/A33:03	3	B44:03/B44:03	3	C14:03/C14:03	2
			A33:03/A99:99	26	B44:03/B99:99	26	C14:03/C99:99	25
		Serological equivalent	A33/Blank	65	B44/Blank	65	Blank	25
							Cw1/Blank	6
							Cw14/Blank	9

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 11 . Results of HLA class II typing in 2022.

Trials	Specimen	Resolution	HLA-DR	No. of labs	HLA-DQ	No. of labs	DP	No. of labs
1st	IHL-22-01	Generic type	DRB109/DRB110	65	DQB103/DQB105	47	DPB1*05/Blank	8
		Allelic type	DRB109:01/DRB110:01	30	DQB103:03/DQB105:01	22	DPB105:01/DPB199:99	8
			DRB109:01G/DRB110:01G	2
		Serological equivalent	DR9/DR10	65	DQ5/DQ9	47
	IHL-22-02	Generic type	DRB104/DRB114	65	DQB103/DQB105	47	DPB102/DPB105	8
		Allelic type	DRB104:06/DRB114:01	3	DQB103:02/DQB105:03	22	DPB102:01/DPB105:01	8
			DRB104:06/DRB114:54	27
			DRB104:06G/DRB114:01G	2
		Serological equivalent	DR4/Blank	2	DQ5/DQ8	47
			DR4/DR14	63
2nd	IHL-19-03	Generic type	DRB104/DRB108	65	DQB104/DQB106	47	DPB103/DPB105	10
		Allelic type	DRB104:05/DRB108:03	28	DQB104:01/DQB106:01	21	DPB103:01/DPB105:01	10
			DRB104:05G/DRB108:03G	1
		Serological equivalent	DR4/DR8	65	DQ4/DQ6	47
	IHL-19-04	Generic type	DRB1*13/Blank	65	DQB1*06/Blank	47	DPB102/DPB104	10
		Allelic type	DRB113:02/DRB113:02	3	DQB106:04/DQB199:99	21	*DPB102:01/DPB1:*	1
			DRB113:02/DRB199:99	25			DPB102:01/DPB104:01	9
			DRB113:02G/DRB199:99	1
		Serological equivalent	DR13/Blank	65	DQ6/Blank	47

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

3. 특수조직적합성 형별검사(HLA-B27, -B51, -B*58:01 typing)

강직성 척수염(ankylosing spondylitis)과 관련성이 있는 HLA-B27 형별검사는 지속적으로 60개 이상의 기관들에서 시행하고 있으며, 한 기관에서 유세포분석법(flow cytometry)을 사용 중이었는데, 모든 기관에서 지속적으로 100%의 정답률을 유지하고 있었다(Table 12). 2018년에 설문조사를 통해 시행기관 및 외부정도관리 프로그램 참여의사를 파악한 후 2020년 1차부터는 베쳇병(Behcet disease)과 관련성이 있는 HLA-B51 형별검사를 도입하였는데, 30여 개 기관에서 지속적으로 참여 중인데, unacceptable 결과를 보고하는 기관이 관찰되었다(Table 13). 2022년 2차부터는 약물, 특히 allopurinol 과민반응과 관련이 잘 알려진 HLA-B*58:01에 대한 형별검사를 시범사업으로 도입하였다. 총 8개 기관이 참여하였는데, sequence-based typing 기반 시약을 사용한 기관이 한 기관이었고, 그 외 7개 기관은 ‘other method’로 입력하여 상세한 정보를 파악하기 어려웠다(Table 14).

Table 12 . Methods and results of HLA-B27 typing.

Methods/manufacturers	2019				2020				2021				2022
	1st		2nd		1st		2nd		1st		2nd		1st		2nd
	IB27-19-01	IB27-19-02	IB27-19-03	IB27-19-04	IB27-20-01	IB27-20-02	IB27-20-03	IB27-20-04	IB27-21-01	IB27-21-02	IB27-21-03	IB27-21-04	IB27-22-01	IB27-22-02	IB27-22-03	IB27-22-04
	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Absent	Present	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent
Flow cytometry	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
Becton Dickinson	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
Other methods	2	2	2	2	2	2	2	2			1	1	1	1	1	1
Others	2	2	2	2	2	2	2	2			1	1	1	1	1	1
PCR	40	40	38	38	37	37	29	29	28	28	26	26	24	24	24	24
BioCore	8	8	8	8	7	7	7	7	6	6	5	5	4	4	4	4
Biosewoom	18	18	16	16	17	17	17	17	17	17	17	17	17	17	17	17
Genotech	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
LDT	4	4	4	4	4	4	4	4	4	4	3	3	3	3	3	3
PCR-SSP	9	9	9	9	8	8	7	7	5	5	5	5	5	5	5	5
Biowithus Inc.	9	9	9	9	8	8	7	7	5	5	5	5	5	5	5	5
Real-time PCR	18	18	20	20	20	20	22	22	26	26	28	28	32	32	32	32
Genetree							1	1	1	1	1	1	2	2	2	2
BioCore											1	1	1	1	1	1
Bioneer	5	5	5	5	4	4	5	5	5	5	5	5	5	5	5	5
Biosewoom	10	10	11	11	12	12	12	12	12	12	12	12	12	12	12	12
Osang Healthcare*	3	3	4	4	4	4	4	4	8	8	9	9	12	12	12	12
Total	61	61	61	61	60	60	61	61	60	60	61	61	63	63	63	63

The instruments were from the following companies: Becton Dickinson (Franklin Lakes, NJ, USA), BioCore (Seoul, Korea), Biosewoom (Seoul, Korea), GenDx (Utrecht, The Netherlands), Biowithus Inc. (Seoul, Korea), Genetree (Seoul, Korea), Bioneer (Daejeon, Korea), and Osang Healthcare (Anyang, Korea)..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; PCR, polymerase chain reaction; SSP, sequence specific primers..

*Previously Infopia until 2020..

Table 13 . Methods and results of HLA-B51 typing.

Methods/manufacturers	2019					2020				2021				2022
	1st			2nd		1st		2nd		1st		2nd		1st				2nd
	IB51-19-01	IB51-19-02		IB51-19-03	IB51-19-04	IB51-20-01	IB51-20-02	IB51-20-03	IB51-20-04	IB51-21-01	IB51-21-02	IB51-21-03	IB51-21-04	IB51-22-01		IB51-22-02		IB51-22-03	IB51-22-04
	Present	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent
Nested PCR	3	1	2	3	3	3	3	3	3	3	3	2	2	2			2	2	2
LDT	3	1	2	3	3	3	3	3	3	3	3	2	2	2			2	2	2
Other methods	4		4	3	3	4	4	4	4	2	2	4	4	4			4	4	4
BioCore												1	1	1			1	1	1
Biosewoom	1		1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1			1	1	1
Biowithus Inc.	1		1	1	1	1	1	0	0
Others	2		2	1	1	2	2	3	3	1	1	2	2	2			2	2	2
PCR	6		6	6	6	5	5	5	5	4	4	4	4	4			4	4	4
Amplicon	1		1	1	1	1	1	1	1
Biosewoom	5		5	5	5	4	4	4	4	4	4	4	4	4			4	4	4
PCR-SSP	10		10	9	9	7	7	7	7	7	7	6	6	5			5	5	5
BioCore	4		4	3	3	3	3	3	3	3	3	2	2	2			2	2	2
Biosewoom	6		6	6	6	4	4	4	4	4	4	4	4	3			3	3	3
Real-time PCR	5		5	7	7	9	9	10	10	13	13	14	14	14	1	1	14	15	15
Genetree				1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1			1	1	1
Biosewoom	2		2	2	2	4	4	5	5	4	4	4	4	4			4	4	4
Infopia	3		3	4	4	4	4	4	4	8	8	9	9	9	1	1	9	10	10
Total	28	1	27	28	28	28	28	29	29	29	29	30	30	29	1	1	29	30	30

The instruments were from the following companies: BioCore (Seoul, Korea), Biosewoom (Seoul, Korea), Biowithus Inc. (Seoul, Korea), and Genetree (Seoul, Korea)..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; PCR, polymerase chain reaction; SSP, sequence specific primers..

Table 14 . Methods and results of HLA-B*58:01 typing.

Methods/manufacturers	2022-2nd
Methods/manufacturers	IB58-22-01Present	IB58-22-02 Absent
Other methods	7	7
Micro SSP Allele Specific HLA Class I DNA Typing Tray - B*58, One Lambda	1	1
Others	6	6
Sequence-based typing	1	1
AVITA HLA-B SBT kit, BIOWITHUS	1	1
Total	8	8

The instruments were from the following companies: One Lambda (Canoga Park, CA, USA) and Biowithus Inc. (Seoul, Korea), respectively..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

4. 조직적합성 교차시험검사(HLA crossmatching)

각 회차당 두 개의 혈청과 두 개의 단핵구부유액을 배송하여 4쌍씩의 교차시험을 시행하도록 하였으며, 총 8쌍의 결과를 얻었으며 그 결과를 Tables 15–18에 정리하였다.

Table 15 . Methods and results of HLA crossmatching in 2019.

Trials	Specimen	Methods	Total no. of labs	Qualitative results (no. of labs)			Semi-quantitative results (no. of labs)								Intended response
Trials	Specimen	Methods	Total no. of labs	Negative	Positive	NA	Negative	1:1	1:2	1:4	1:8	1:16	1:32	>1:32	Intended response
1st	IX-19-01 + IX-19-03	T-CDC-Direct	45	0	45						3	9	19	14	Positive
		T-CDC-AHG	47	0	47						2	8	21	16	Positive
		B-CDC-Direct	22	0	22							2	14	6	Positive
		T-FCM	33	0	33										Positive
		B-FCM	23	0	22	1									Positive
	IX-19-01 + IX-19-04	T-CDC-Direct	45	45	0		45								Negative
		T-CDC-AHG	47	47	0		47								Negative
		B-CDC-Direct	22	21	1		21						1		Negative
		T-FCM	33	33	0										Negative
		B-FCM	23	16	6	1									Code 505
	IX-19-02 + IX-19-03	T-CDC-Direct	45	0	45					4	12	16	10	3	Positive
		T-CDC-AHG	47	0	47					1	6	9	20	11	Positive
		B-CDC-Direct	22	0	22					1	4	5	10	2	Positive
		T-FCM	33	0	33										Positive
		B-FCM	23	0	22	1									Positive
	IX-19-02 + IX-19-04	T-CDC-Direct	45	45	0										Negative
		T-CDC-AHG	47	47	0										Negative
		B-CDC-Direct	22	22	0										Negative
		T-FCM	33	31	2										Negative
		B-FCM	23	22	0	1									Negative
2nd	IX-19-05 + IX-19-07	T-CDC-Direct	45	2	43		2	11	9	12	8	1	2		Positive
		T-CDC-AHG	47	0	47			1	8	7	8	18	3	2	Positive
		B-CDC-Direct	22	0	22						1	6	7	8	Positive
		T-FCM	33	0	33										Positive
		B-FCM	23	0	23										Positive
	IX-19-05 + IX-19-08	T-CDC-Direct	45	45	0		45								Negative
		T-CDC-AHG	47	47	0		47								Negative
		B-CDC-Direct	22	21	1		21	1							Negative
		T-FCM	33	33	0										Negative
		B-FCM	23	11	12										Code 505
	IX-19-06 + IX-19-07	T-CDC-Direct	45	24	21		24	8	8	2	3				Code 505
		T-CDC-AHG	47	5	42		5	11	7	11	6	4	2	1	Positive
		B-CDC-Direct	22	6	16		6	2	1	3	5	1	4		Code 505
		T-FCM	33	1	32										Positive
		B-FCM	23	1	22										Positive
	IX-19-06 + IX-19-08	T-CDC-Direct	45	45	0		45								Negative
		T-CDC-AHG	47	47	0		47								Negative
		B-CDC-Direct	22	19	3		19	1		1			1		Code 505
		T-FCM	33	33	0										Negative
		B-FCM	22	8	14										Code 505

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; NA, not available; CDC-Direct, Center for Disease Control and Prevention-Direct; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry..

Table 16 . Methods and results of HLA crossmatching in 2020.

Trials	Specimen	Methods	Total no. of labs	Qualitative results (no. of labs)			Semi-quantitative results (no. of labs)								Intended response
Trials	Specimen	Methods	Total no. of labs	Negative	Positive	NA	Negative	1:1	1:2	1:4	1:8	1:16	1:32	>1:32	Intended response
1st	IX-20-01 + IX-20-03	T-CDC-Direct	43	5	38		5	3	11	15	7	1	1		Positive
		T-CDC-AHG	45	0	45				3	15	18	7	2		Positive
		B-CDC-Direct	21	0	21			1	2	5	3	4	5	1	Positive
		T-FCM	31	0	31										Positive
		B-FCM	22	0	20	2									Positive
	IX-20-01 + IX-20-04	T-CDC-Direct	43	43	0		43								Negative
		T-CDC-AHG	45	45	0		45								Negative
		B-CDC-Direct	21	1	20		1				1	3	12	4	Positive
		T-FCM	31	29	2										Negative
		B-FCM	22	0	20	2									Positive
	IX-20-02 + IX-20-03	T-CDC-Direct	43	42	1						1				Negative
		T-CDC-AHG	45	38	7		38	2	4			1			Code 505
		B-CDC-Direct	21	12	9		12	2	1	1	3	1	1		Code 505
		T-FCM	31	21	10										Code 505
		B-FCM	22	3	18	1									Positive
	IX-20-02 + IX-20-04	T-CDC-Direct	43	42	1		42	1							Negative
		T-CDC-AHG	45	44	1		44		1						Negative
		B-CDC-Direct	21	13	8		13	2		1	2		3		Code 505
		T-FCM	31	31	0										Negative
		B-FCM	22	4	17	1									Code 505
2nd	IX-20-05 + IX-20-07	T-CDC-Direct	44	44	0		44								Negative
		T-CDC-AHG	47	46	1		46	1							Negative
		B-CDC-Direct	21	19	2		19					1		1	Negative
		T-FCM	33	33	0										Negative
		B-FCM	27	18	8	1									Code 505
	IX-20-05 + IX-20-08	T-CDC-Direct	44	41	3		41	1	1	1					Negative
		T-CDC-AHG	46	16	30		16	3	5	7	9	4	1	1	Code 505
		B-CDC-Direct	21	11	10		11	3	1		1		3	2	Code 505
		T-FCM	33	1	32										Positive
		B-FCM	27	1	25	1									Positive
	IX-20-06 + IX-20-07	T-CDC-Direct	44	44	0		44								Negative
		T-CDC-AHG	46	45	1		45	1							Code 505
		B-CDC-Direct	21	2	19		2		2		2	3	8	4	Positive
		T-FCM	33	13	20										Code 505
		B-FCM	27	1	25	1									Positive
	IX-20-06 + IX-20-08	T-CDC-Direct	44	0	44			1	9	17	10	5	2		Positive
		T-CDC-AHG	46	0	46					7	9	14	12	4	Positive
		B-CDC-Direct	21	0	21					1	1	4	10	5	Positive
		T-FCM	33	0	33										Positive
		B-FCM	27	0	26	1									Positive

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; NA, not available; CDC-Direct, Center for Disease Control and Prevention-Direct; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry..

Table 17 . Methods and results of HLA crossmatching in 2021.

Trials	Specimen	Methods	Total no. of labs	Qualitative results (no. of labs)			Semi-quantitative results (no. of labs)								Intended response
Trials	Specimen	Methods	Total no. of labs	Negative	Positive	NA	Negative	1:1	1:2	1:4	1:8	1:16	1:32	>1:32	Intended response
1st	IX-21-01 + IX-21-03	T-CDC-Direct	44	44	0		44								Negative
		T-CDC-AHG	46	46	0		46								Negative
		B-CDC-Direct	23	20	3		20						3		Negative
		T-FCM	33	33	0										Negative
		B-FCM	26	10	16										Code 505
	IX-21-01 + IX-21-04	T-CDC-Direct	44	44	0		44								Negative
		T-CDC-AHG	46	46	0		46								Negative
		B-CDC-Direct	23	16	7		16	3		1	2		1		Code 505
		T-FCM	33	33	0										Negative
		B-FCM	26	3	23										Positive
	IX-21-02 + IX-21-03	T-CDC-Direct	44	42	2		42					1	1		Negative
		T-CDC-AHG	46	44	2		44		1				1		Negative
		B-CDC-Direct	23	1	22		1		1			1	11	9	Positive
		T-FCM	33	33	0										Negative
		B-FCM	26	1	25										Positive
	IX-21-02 + IX-21-04	T-CDC-Direct	44	42	2		42	1					1		Negative
		T-CDC-AHG	46	44	2		44	1					1		Negative
		B-CDC-Direct	23	17	6		17	3		2	1				Code 505
		T-FCM	33	21	12										Code 505
		B-FCM	26	1	25										Positive
2nd	IX-21-05 + IX-21-07	T-CDC-Direct	44	37	7		37	1	2			1	3		Code 505
		T-CDC-AHG	46	27	19		27	5	4	2	1	4	3		Code 505
		B-CDC-Direct	24	0	24				1	1	2	6	11	3	Positive
		T-FCM	33	3	30										Positive
		B-FCM	26	0	26										Positive
	IX-21-05 + IX-21-08	T-CDC-Direct	44	43	1		43				1				Negative
		T-CDC-AHG	46	44	2		44			1		1			Negative
		B-CDC-Direct	24	1	23		1	1		1	2	4	11	4	Positive
		T-FCM	33	16	17										Code 505
		B-FCM	26	0	26										Positive
	IX-21-06 + IX-21-07	T-CDC-Direct	44	5	39		5	5	5	13	9	2	4	1	Positive
		T-CDC-AHG	46	0	46				5	6	9	6	16	4	Positive
		B-CDC-Direct	24	0	24				1	2	4	3	12	2	Positive
		T-FCM	33	0	33										Positive
		B-FCM	26	0	26										Positive
	IX-21-06 + IX-21-08	T-CDC-Direct	44	42	2		42		1			1			Negative
		T-CDC-AHG	46	41	5		41	1	1			2	1		Code 505
		B-CDC-Direct	24	2	22		2	1	1	1	2	3	10	4	Positive
		T-FCM	33	19	14										Code 505
		B-FCM	26	0	26										Positive

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; NA, not available; CDC-Direct, Center for Disease Control and Prevention-Direct; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry..

Table 18 . Methods and results of HLA crossmatching in 2022.

Trials	Specimen	Methods	Total no. of labs	Qualitative results (no. of labs)			Semi-quantitative results (no. of labs)								Intended response
Trials	Specimen	Methods	Total no. of labs	Negative	Positive	NA	Negative	1:1	1:2	1:4	1:8	1:16	1:32	>1:32	Intended response
1st	IX-22-01 + IX-22-03	T-CDC-Direct	43	23	20		23	1	5	8	4	1	1		Code 505
		T-CDC-AHG	46	2	44		2	2	6	8	12	8	7	1	Positive
		B-CDC-Direct	24	5	19		5	4	4	4	2	1	4		Code 505
		T-FCM	33	0	33										Positive
		B-FCM	27	0	27										Positive
	IX-22-01 + IX-22-04	T-CDC-Direct	43	43	0		43								Negative
		T-CDC-AHG	46	46	0		46								Negative
		B-CDC-Direct	24	21	3		21		2				1		Code 505
		T-FCM	33	32	1										Negative
		B-FCM	27	10	16	1									Code 505
	IX-22-02 + IX-22-03	T-CDC-Direct	43	28	15		28	3	1	4	6	1			Code 505
		T-CDC-AHG	46	9	37		9	7	3	5	12	6	4		Code 505
		B-CDC-Direct	24	12	12		12	4	2	1	2		3		Code 505
		T-FCM	33	1	32										Positive
		B-FCM	27	0	27										Positive
	IX-22-02 + IX-22-04	T-CDC-Direct	43	43	0		43								Negative
		T-CDC-AHG	46	46	0		46								Negative
		B-CDC-Direct	24	20	4		20	1	1	1			1		Code 505
		T-FCM	33	33	0										Negative
		B-FCM	27	6	21										Code 505
2nd	IX-22-05 + IX-22-07	T-CDC-Direct	44	44	0		44								Negative
		T-CDC-AHG	46	46	0		46								Negative
		B-CDC-Direct	25	19	6		19	1		1			2	2	Code 505
		T-FCM	34	28	6										Code 505
		B-FCM	28	6	22										Code 505
	IX-22-05 + IX-22-08	T-CDC-Direct	44	43	1		43					1			Negative
		T-CDC-AHG	46	45	1		45				1				Negative
		B-CDC-Direct	25	0	25						2	3	11	9	Positive
		T-FCM	34	34	0										Negative
		B-FCM	28	0	28										Positive
	IX-22-06 + IX-22-07	T-CDC-Direct	44	44	0		44								Negative
		T-CDC-AHG	47	47	0		47								Negative
		B-CDC-Direct	25	20	5		20	1		1			2	1	Code 505
		T-FCM	34	33	1										Negative
		B-FCM	28	6	22										Code 505
	IX-22-06 + IX-22-08	T-CDC-Direct	44	29	15		29	8	1	2	1		2	1	Code 505
		T-CDC-AHG	47	8	39		8	6	11	5	3	9	2	3	Positive
		B-CDC-Direct	25	9	16		9	1	5	3	2	2	3		Code 505
		T-FCM	34	2	32										Positive
		B-FCM	28	0	28										Positive

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses..

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; NA, not available; CDC-Direct, Center for Disease Control and Prevention-Direct; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry..

방법 섹션에서 언급한 바대로 2020년부터 새로운 판정기준을 적용하였는데, 이로 인해 code 505를 부여하는 경우가 증가하는 경향을 보였다. 이는 좀 더 민감도가 높은 FCMXM 또는 SABID에서 확인한 DSA 여부를 반영하여 FCMXM에서 10% 이상 그리고 DSA가 50% 초과의 기관에서 양성 보고한 경우에는 각각 Center for Disease Control and Prevention-crossmatching (CDCXM)과 FCMXM 음성 보고 판정 시 code 505를 부여하였기 때문이다. Unacceptable 판정을 받은 오답률은 검사방법이나 phase마다 차이가 있으나 전체적으로는 고르게 분포하였다. CDC 반정량 결과는 양성의 검체의 경우 4개의 희석배수 이상에 걸쳐 넓게 분포하였다. B-FCMXM에서는 검체는 수령하였으나 결과를 보고하지 않은(not available) 기관이 있었다.

주목할 만한 사항은 각 기관별로 교차시험 시행방법이 다양해지고 있는데, FCMXM이 CDCXM법을 대체하거나 증가되는 경향이 있는데, 특히 B세포의 경우 B-FCMXM만을 시행하는 기관들이 B-CDC-Direct를 시행하는 기관 수보다 더 많았다(Table 19).

Table 19 . Different strategies for HLA crossmatching in participating laboratories.

Methods	Year
Methods	2019	2020	2021	2022
T-CDC-Direct + T-CDC-AHG + T-FCM	30	30	30	30
T-CDC-Direct + T-CDC-AHG	15	14	14	14
T-CDC-AHG + T-FCM	2	2	2	3
T-FCM		1	1	1
Total	47	47	47	48
B-CDC-Direct + B-FCM	12	15	16	17
B-CDC-Direct	10	6	8	8
B-FCM	11	12	10	11
Total	33	33	34	36

Abbreviations: HLA, human leukocyte antigen; CDC-Direct, Center for Disease Control and Prevention-Direct; AHG, anti-human globulin; FCM, flow cytometry..

5. 조직적합성 항체검사(HLA antibody testing)

각 회차당 두 개의 혈청을 배송하여 총 네 개의 물질에 대한 결과를 얻었다. 조직적합성 항체검사는 선별(screening)과 동정(identification) 모두 Immucor Lifecodes사(Stamford, CT, USA)와 One Lambda사(Canoga Park, CA, USA)의 luminex microbead array 기반의 시약을 사용한 SABID법으로 이루어져 왔으나 Immucor Lifecodes사가 2021년부터는 국내 사용이 불가하게 되어 더 이상 사용되고 있지 않고 모든 기관이 One Lambda사의 시약을 사용하고 있다. Table 20과 Table 21에 모든 항체검사법에 대하여 연도별, 회차별, 그리고 사용시약 정보를 정리하였다.

Table 20 . Kits and results of HLA antibody tests (2019, 2020).

Program/manufacturers/kits	2019								2020
	1st				2nd				1st				2nd
	IHA-19-01		IHA-19-02		IHA-19-03		IHA-19-04		IHA-20-01		IHA-20-02		IHA-20-03		IHA-20-04
	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent
Class I screening	21			21	21		19	2	20	1	11	10	22		22
Gen-Probe/Lifecodes LifeScreen Deluxe	9			9	4		2	2	3		1	2	1		1
One Lambda/LABScreen Mixed	12			12	17		17		17	1	10	8	21		21
Class II screening	21		21		21		21		19	2	20	1	22		22
Gen-Probe/Lifecodes LifeScreen Deluxe	9		9		4		4		3		3		1		1
One Lambda/LABScreen Mixed	12		12		17		17		16	2	17	1	21		21
Class I phenotyping	11			11	10		8	2	10		3	7	10		10
Gen-Probe/Lifecodes Class I ID	7			7	3		3		2		2		1		1
One Lambda/LABScreen PRA Class I	4			4	7		5	2	8		1	7	9		9
Class II phenotyping	11		11		8		8		9		9		9		9
Gen-Probe/Lifecodes Class II ID	7		7		1		1		1		1
One Lambda/LABScreen PRA Class II	4		4		7		7		8		8		9		9
Class I single antigen	22		2	20	22		22		21		18	3	24		24
Gen-Probe/Lifecodes LSA Class I	10			10	6		6		4		1	3
One Lambda/LABScreen Single Antigen Class I	12		2	10	16		16		17		17		24		24
Class II single antigen	22		22		22		22		21		21		24		24
Gen-Probe/Lifecodes LSA Class II	10		10		6		6		4		4
One Lambda/LABScreen Single Antigen Class II	12		12		16		16		17		17		24		24

Bold letter indicates the results which are not compliant with the intended responses. The instruments were from the following companies: Gen-Probe (San Diego, CA, USA) and One Lambda (Canoga Park, CA, USA)..

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 21 . Kits and results of HLA antibody tests (2021, 2022).

Program/manufacturers/kits	2021								2022
	1st				2nd				1st				2nd
	IHA-21-01		IHA-21-02		IHA-21-03		IHA-21-04		IHA-22-01		IHA-22-02		IHA-22-03		IHA-22-04
	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent	Present	Absent
Class I screening	1	21	22		22		22		21		21		22		22
Gen-Probe/Lifecodes LifeScreen Deluxe
One Lambda/LABScreen Mixed	1	21	22		22		22		21		21		22		22
Class II screening	22		22		22		22		21		21		22		22
Gen-Probe/Lifecodes LifeScreen Deluxe
One Lambda/LABScreen Mixed	22		22		22		22		21		21		22		22
Class I phenotyping		10	10		10		10		10		10		11		11
Gen-Probe/Lifecodes Class I ID
One Lambda/LABScreen PRA Class I		10	10		10		10		10		10		11		11
Class II phenotyping	10		10		10		10		10		10		11		11
Gen-Probe/Lifecodes Class II ID
One Lambda/LABScreen PRA Class II	10		10		10		10		10		10		11		11
Class I single antigen	18	6	24		24		24		24		24		25		25
Gen-Probe/Lifecodes LSA Class I
One Lambda/LABScreen Single Antigen Class I	18	6	24		24		24		24		24		25		25
Class II single antigen	24		24		24		24		24		24		25		25
Gen-Probe/Lifecodes LSA Class II
One Lambda/LABScreen Single Antigen Class II	24		24		24		24		24		24		25		25

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

동정검사의 경우에는 여러 개의 항원이 한 비드에 부착되어 있는 시약을 이용한 표현형(phenotyping) 검사와 한 개의 항원이 한 비드에 부착되어 있는 시약을 이용한 단일항원형 동정(single antigen identification) 검사가 모두 시행되고 있는데, 2021년 2차 이후에는 정답률 100%를 보이고 있다(Tables 20, 21).

동정항원별 보고기관 수의 분포를 파악할 수 있는 통계시스템을 도입하였는데, 현재 SABID의 경우 정성결과를 제외하고는 평가 제외 항목으로 판정을 보류하고 있으나, 해당 자료를 통해 consensus에 이르기 어려운 수의 동정항원을 보고한 경우 문제가 있음을 추측할 수 있다(Tables 22–25). Percent reactive antibody (PRA) 또는 calculated percent reactive antibodies (cPRA) 값의 보고범위는 여전히 넓었는데, 일부 기관에서 아직도 PRA를 도출하는 방식이 다른 것으로 추정되었다. 2022년도 IHA-22-03 class I의 경우 5%–39% PRA, class II의 경우 8%–68% PRA를 보고하였으며, IHA-22-04 class I의 경우 11%–60% PRA, class II의 경우 45%–99% PRA를 보고하였다.

Table 22 . Distribution of HLA antibodies identified by single antigen-based antibody identification tests in 2019.

Variable	HLA antigen	No. of labs
1st
IHA-01
Class I	Total	22
	A11	21
	A26	21
	B7	21
	B8	21
	B27	21
	B35	21
	B37	21
	B44	21
	B46	21
	B47	21
	B52	21
	B54	21
	B55	21
	B56	21
	B57	21
	B58	21
	B59	21
	B81	21
	A1	20
	A29	20
	A33	20
	A66	20
	A68	20
	B13	20
	B18	20
	B38	20
	B49	20
	B50	20
	B63	20
	B64	20
	B67	20
	A25	19
	A30	19
	A31	19
	A34	19
	A43	19
	B42	19
	B45	19
	B51	19
	B53	19
	B62	19
	B65	19
	B71	19
	B73	19
	B75	19
	B78	19
	Cw1	19
	A36	18
	A69	18
	B41	18
	B72	18
	B76	18
	B77	18
	Cw4	18
	Cw8	18
	A3	17
	A80	17
	Cw15	17
	Cw12	16
	Cw14	16
	Cw16	16
	B39	15
	B82	15
	Cw5	12
	Cw6	12
	Cw7	11
	Other	7
	3901	5
	A32	5
	Cw2	5
	A74	3
	703	2
	A24	1
Class II	Total	22
	DR8	21
	DR13	21
	DR17	19
	DR14	17
	DR18	17
	Other	12
	DR1404	6
	DR10	3
	DR12	2
	DR1403	2
	DR53	1
IHA-02
Class I	Total	22
	A26	2
	A43	2
	A66	2
	A34	1
Class II	Total	22
	DR12	22
	DR13	22
	DR15	22
	DR4	21
	DQ2	19
	DR103	15
	DR11	13
	DR16	11
	DR8	8
	DR51	6
	DR1	5
	DR1403	5
	DR14	3
	Other	3
	DQ5	1
2nd
IHA-03
Class I	Total	22
	Cw8	22
	A1	21
	A2	21
	A3	21
	A11	21
	A26	21
	A29	21
	A30	21
	A31	21
	A32	21
	A33	21
	A68	21
	B7	21
	B13	21
	B27	21
	B44	21
	B48	21
	B50	21
	B57	21
	B58	21
	B60	21
	B61	21
	Cw5	21
	A25	20
	A69	20
	B41	20
	B45	20
	B47	20
	B81	20
	A34	19
	A36	19
	A43	19
	A66	19
	A74	19
	A80	19
	B73	19
	B49	18
	Cw7	12
	A203	4
	A23	4
	703	2
	B63	2
	B67	2
	B38	1
	B39	1
	B64	1
	Cw12	1
	Cw16	1
	Cw2	1
	Other	1
Class II	Total	22
	DR1	21
	DR7	21
	DR10	21
	DR15	21
	DR16	21
	DQ5	22
	DQ4	21
	DQ6	21
	DR9	20
	DR51	20
	DR103	16
	Other	2
	DR8	1
	DR11	1
	DR12	1
	DR14	1
	DR17	1
	DR18	1
	DR52	1
	DQ9	1
IHA-04
Class I	Total	22
	B38	21
	Cw7	21
	B67	20
	B39	17
	Cw12	17
	Cw8	16
	B64	15
	Cw6	12
	Cw9	11
	B73	10
	Cw4	10
	Cw16	9
	B63	8
	Cw10	8
	A68	6
	Cw2	6
	B65	5
	3901	4
	A11	4
	Other	4
	B27	3
	A2	2
	A26	2
	A29	2
	A33	2
	B13	2
	B57	2
	B58	2
	B81	2
	Cw5	2
	A1	1
	A3	1
	A25	1
	A30	1
	A31	1
	A32	1
	A34	1
	A36	1
	A43	1
	A66	1
	A69	1
	A74	1
	A80	1
	B7	1
	B8	1
	B35	1
	B37	1
	B41	1
	B44	1
	B45	1
	B46	1
	B47	1
	B48	1
	B50	1
	B51	1
	B55	1
	B56	1
	B59	1
	B60	1
	B61	1
	B75	1
	Cw14	1
	Cw15	1
Class II	Total	22
	DR8	21
	DR11	21
	DR12	21
	DR13	21
	DR17	21
	DR18	21
	DR14	18
	DR52	18
	DQ5	17
	DR16	7
	DR1403	3
	DR1404	3
	DR4	2
	DQ4	2
	DR1	1
	DR7	1
	DR9	1
	DR10	1
	DR103	1
	DR15	1
	DR51	1
	DQ2	1
	DQ6	1
	DQ8	1
	DQ9	1

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 23 . Distribution of HLA antibodies identified by single antigen-based antibody identification tests in 2020.

Variable	HLA antigen	No. of labs
1st
IHA-01
Class I	Total	21
	A23	21
	A24	21
	A32	21
	B7	21
	B13	21
	B27	21
	B44	21
	B47	21
	B48	21
	B49	21
	B50	21
	B57	21
	B58	21
	B60	21
	B63	21
	A1	20
	A25	20
	A80	20
	B41	20
	B45	20
	B61	20
	B73	20
	B76	20
	B81	20
	Cw2	19
	Cw15	18
	A26	17
	A66	17
	Cw5	17
	A69	15
	B38	9
	Other	5
	Cw4	4
	A2403	2
	A33	2
	Cw6	2
	703	1
	B53	1
Class II	Total	21
	DR7	21
	DR8	21
	DR11	21
	DR12	21
	DR13	21
	DR16	21
	DQ6	21
	DR14	20
	DR4	19
	DR51	18
	DR103	16
	DR53	15
	Other	10
	DR17	7
	DR15	5
	DR1403	2
	DR1404	2
	DR18	2
	DR1	1
	DR3	1
IHA-02
Class I	Total	21
	B51	18
	B57	8
	B78	6
	B35	4
	B75	4
	B53	3
	Blank	3
	B62	2
	B71	2
	B46	1
	B49	1
	B56	1
	Cw2	1
	Cw15	1
Class II	Total	21
	DR4	20
	DR8	20
	DR12	20
	DR52	20
	DQ4	20
	DQ8	20
	DQ9	20
	DQ2	18
	DQ6	18
	DQ7	17
	DR17	14
	DR13	13
	DR11	9
	DR9	9
	Other	9
	DR14	8
	DR18	4
	DQ5	4
	DR7	3
	DR1403	2
	DR1404	2
	DR3	1
	DQ1	1
2nd
IHA-03
Class I	Total	24
	A23	24
	A24	24
	B54	24
	A80	23
	B59	20
	B42	12
	B8	5
	B67	3
	A2403	1
	B55	1
Class II	Total	24
	DR1	24
	DR7	24
	DR9	24
	DR10	24
	DQ2	24
	DQ4	24
	DQ5	24
	DQ6	24
	DQ9	24
	DQ8	23
	DR14	23
	DR51	23
	DR4	22
	DR53	22
	DR103	21
	DR52	11
	DQ7	8
	Other	7
	DR15	4
	DR16	4
IHA-04
Class I	Total	24
	A2	24
	A29	24
	A68	24
	B8	24
	B62	24
	B75	24
	A26	23
	A31	23
	A32	23
	A33	23
	A34	23
	B13	23
	B27	23
	B38	23
	B44	23
	B46	23
	B49	23
	B51	23
	B57	23
	B58	23
	B59	23
	B63	23
	B67	23
	B73	23
	B76	23
	A25	22
	A43	22
	A66	22
	A69	22
	A74	22
	B37	22
	B47	22
	B52	22
	B53	22
	B77	22
	Cw7	22
	B42	20
	B55	18
	B72	14
	Other	11
	B48	6
	A3	5
	Bw4	2
	5102	1
Class II	Total	24
	DR1	24
	DR9	24
	DR10	24
	DR15	24
	DR16	24
	DR51	24
	DQ5	24
	DQ6	24
	DR12	23
	DR11	22
	DR103	20
	DR13	4
	Other	4
	DR4	1
	DR7	1
	DR8	1
	DR1403	1
	DR53	1

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 24 . Distribution of HLA antibodies identified by single antigen-based antibody identification tests in 2021.

Variable	HLA antigen	No. of labs
1st
IHA-01
Class I	Total	24
	B45	18
	Blank	6
Class II	Total	24
	DQ7	24
	DQ8	24
	DQ9	24
	DQ2	22
	DQ6	22
	DQA1*04:01	15
	DQA1*05:01	13
	DQA1*03:02	11
	DQA1*05:03	11
	DQA1*05:05	11
	DR12	9
	DQA1*03:01	9
	DQA1*06:01	9
	DQA1*02:01	7
	DQ4	2
	DQA1*01:03	2
	DR7	1
	DR13	1
	DR103	1
	Other	1
IHA-02
Class I	Total	24
	A23	24
	A24	24
	A2403	1
Class II	Total	24
	DR9	24
	DR10	24
	DR53	24
	DQA1*03:02	17
	DQA1*03:03	17
	DR7	12
	DQA1*03:01	9
	DQ2	8
	DQ8	6
	DQ9	5
	DQ4	3
	DQ7	2
	DP6	1
2nd
IHA-03
Class I	Total	24
	A29	24
	B54	24
	B57	24
	B58	24
	B63	24
	B67	24
	B7	23
	B27	23
	B42	23
	B55	23
	B56	23
	B81	23
	B73	22
	B82	22
	B8	18
	Cw5	16
	Cw8	11
	B61	8
	A32	7
	B75	6
	B41	4
	B78	4
	Cw7	4
	A43	3
	B37	3
	Cw15	3
	A33	2
	B35	2
	B53	2
	Cw12	2
	A3	1
	A34	1
	A66	1
	B7CREG (Rodey)	1
	B39	1
	B51	1
	B62	1
Class II	Total	24
	DR7	24
	DR8	24
	DR9	24
	DR10	24
	DR11	24
	DR12	24
	DR13	24
	DR14	24
	DQ6	24
	DQ5	23
	DR52	22
	DQA1*05:01	15
	DQA1*01:02	11
	DQA1*01:01	10
	DQA1*01:03	9
	DQ2	5
	DQ8	4
	DQA1*03:02	3
	DQ9	2
IHA-04
Class I	Total	24
	B18	24
	B51	24
	A23	23
	A25	23
	A32	23
	B8	23
	B27	23
	B35	23
	B37	23
	B38	23
	B39	23
	B44	23
	B45	23
	B46	23
	B47	23
	B49	23
	B50	23
	B52	23
	B54	23
	B55	23
	B56	23
	B57	23
	B58	23
	B59	23
	B62	23
	B63	23
	B64	23
	B65	23
	B67	23
	B71	23
	B72	23
	B75	23
	B76	23
	A33	22
	B53	22
	B77	22
	B78	22
	B82	22
	A29	18
	B48	7
	Other	6
	B73	4
	A66	1
	B5CREG (Rodey)	1
	B8CREG (Rodey)	1
	B81	1
	Cw7	1
Class II	Total	24
	DR8	24
	DR11	24
	DR13	24
	DQ2	24
	DQ4	24
	DQ5	24
	DR4	23
	DR15	23
	DQ6	23
	DQA1*01:02	10
	DQA1*03:03	10
	DQA1*04:01	10
	DQA1*01:01	9
	DQA1*05:01	9
	DQA1*01:03	8
	DQA1*02:01	4
	DR16	3
	DR7	2
	DR51	1
	DP14	1

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

Table 25 . Distribution of HLA antibodies identified by single antigen-based antibody identification tests in 2022.

Variable	HLA antigen	No. of labs
1st
IHA-01
Class I	Total	24
	A24	24
	A26	24
	A32	24
	A33	24
	A68	24
	B13	24
	B35	24
	B37	24
	B38	24
	B44	24
	B46	24
	B47	24
	B49	24
	B50	24
	B51	24
	B52	24
	B56	24
	B57	24
	B58	24
	B59	24
	B62	24
	B63	24
	B71	24
	B75	24
	Cw9	24
	Cw10	24
	A23	23
	A25	23
	B27	23
	B72	23
	B76	23
	A34	22
	B53	22
	B77	22
	B78	22
	A66	21
	B18	21
	Other	7
	A69	4
	Bw4	1
	Cw5	1
	Cw6	1
	Cw12	1
	Cw15	1
Class II	Total	24
	DR1	24
	DR7	24
	DR9	24
	DR10	24
	DR51	23
	DR103	23
	DP6	16
	DP3	6
	DP20	1
	Other	1
IHA-02
Class I	Total	24
	A25	24
	A26	24
	B46	24
	Cw9	24
	A34	23
	A43	23
	A66	23
	w10	23
	B75	22
	B50	3
	B63	1
	B77	1
Class II	Total	24
	DQ7	24
	DQ8	24
	DQ9	24
	DR9	22
	DR52	20
	DQA1*03:02	12
	DQA1*05:03	12
	DQA1*05:05	12
	DQA1*06:01	12
	DR7	10
	DQA1*03:01	9
	DP6	6
	DQA1*05:01	2
	DP1	2
	DQA1*02:01	1
2nd
IHA-03
Class I	Total	25
	A1	25
	B76	25
	A36	24
	B44	22
	B57	19
	B82	18
	A11	9
	Other	1
Class II	Total	25
	DQ5	25
	DQ6	25
	DQA1*01:01	13
	DQA1*01:02	13
	DQA1*01:03	13
IHA-04
Class I	Total	25
	A30	25
	A31	25
	A32	25
	A33	25
	A3	24
	A36	24
	A74	24
	A29	23
	A66	18
	B37	18
	B63	7
	B46	5
	Cw4	4
	A68	3
	Other	3
	B78	2
	A1CREG (Rodey)	1
	A34	1
	B73	1
	Cw6	1
Class II	Total	25
	DR7	25
	DR8	25
	DR9	25
	DR11	25
	DR12	25
	DR13	25
	DR15	25
	DR16	25
	DQ6	25
	DQ7	25
	DQ8	25
	DQ9	25
	DR51	24
	DQ2	24
	DQ4	24
	DR103	21
	DR4	21
	DP1	13
	DQA1*01:03	12
	DQA1*02:01	12
	DQA1*03:01	12
	DQA1*03:02	12
	DQA1*03:03	12
	DQA1*05:01	12
	DQA1*05:03	12
	DQA1*05:05	12
	DQA1*06:01	12
	DQA1*04:01	11
	DQA1*01:02	7
	DR14	6
	DR17	2
	DP11	1
	DR18	1

Abbreviation: HLA, human leukocyte antigen..

고찰

Go to

Abstract
서론
재료 및 방법
결과
고찰
감사의 글
Reference

조직적합성 검사 신빙도조사는 2018년도에 대한진단검사정도관리협회에서 처음으로 도입되어 시행되고 있다. 그간 결과 입력 및 통계와 보고에 사용되고 있는 대한진단검사정도관리협회의 차세대전산시스템도 검사의 결과 양식이나 특성에 따라 개선을 진행하였다.

이번 보고서는 2019년부터 2022까지 4년간의 조직적합성 검사 신빙도조사를 정리한 것으로 각 연도의 결과뿐 아니라 그동안 참여기관 및 항목의 변화를 파악하는 것에도 유용하였다.

HLA typing에서는 NGS법의 도입 및 2020년 요양급여 세부 인정기준(보건복지부 고시 제2020-49호)이 적용됨에 따라 신장, 췌장 및 조혈모세포 이식 대상 환자와 공여자에서 3종 이상 동시 시행 시 NGS법으로의 검사가 시행되게 되었다. 이로 인해 2021년 2차부터 유의하게 NGS법 사용기관이 증가되었고 고해상도 allelic level의 보고도 점차 증가되고 있다. NGS HLA typing의 경우 최소 5 loci에서 최대 11 loci까지 검사가 가능하여 검사 loci도 확대되는 효과가 있었다. 이를 반영하여 2021년부터는 HLA-DPB1에 대한 신빙도조사도 시범사업으로 시행하게 되었다. 2021년 1차에는 3개 기관이 참여하였으나 2022년 2차에는 10개 기관으로 증가하였다. HLA 형을 기술하는 방식은 2010년 개정된 World Health Organization nomenclature 표기법에 따르고 있는데[2,3], 아직도 부적합 판정을 받는 주된 이유 중 하나가 nomenclature를 표기하는 데 있어 오류였다. 또 다른 주요 요인은 입력 시 단순 오기 또는 오류로 결과 입력 시 주의를 기울여야 할 것이며, 더불어 단순오류를 줄이기 위한 입력시스템의 개선방안도 강구되어야 하겠다.

질병 또는 약물 관련 특수 HLA 형별로는 기존의 HLA-B27 이외에 베체트병과 연관성이 알려져 있는 HLA-B51 형별검사가 2020년부터 도입되었다. HLA-B51은 베체트병 위험인자 중 현재까지 알려진 가능성 높은 단일 위험인자로 알려져 있다[4]. 그 중에서도 특히 유의한 연관성을 갖는 allele은 HLA-B*51:01과 –B*51:08인데[5], 한국인에서는 B*51:01이 allele frequency 9.54%로 흔하고 B*51:08은 보고된 바 없어 저해상도로 검사하여도 임상적 의의를 추정하는 데는 문제가 없겠다. 2022년 2차부터는 allopurinol 과민반응과 관련성이 큰 HLA-B*58:01 형별검사를 시범사업으로 시작하였는데, 8개 기관이 참여하였다. 한국인 5,802명을 대상으로 시행된 연구결과에서 B*58:01을 가진 경우 allopurinol 유도 Stevens-Johnson syndrome/toxic epidermal necrolysis 발생위험도가 57.4배(95% 신뢰구간, 7.12–463.50)나 증가함을 보고한 바 있다[6].

HLA 교차시험 평가기준에 대한 개선안이 논의되었고 2020년 관련 전문가 회의를 통해 새로운 판정기준이 도입되었다. 이는 좀 더 민감도가 높은 FCMXM 및 SABID 검사를 통해 HLA 항체 유무를 객관적으로 판별할 수 있으므로 다수의 기관에서 음성을 보고하더라도 더 예민한 검사에서 양성을 보이는 경우 해석 및 판정의 오류를 피하기 위하여 음성 consensus 수준을 90% 올리고 만약 FCMXM에서 양성 및 SABID를 통한 DSA가 일정 수준 이상 있는 경우에는 판정 제외, 즉 code 505를 부여하기로 하였다. 불합리한 부적합 결과 판정은 줄일 수 있으나 실제 code 505의 빈도는 증가하여 결과를 받은 기관들에서 그 의미를 잘 해석하고 적용할 필요가 있다.

FCMXM에서는 여전히 기관 간 consensus를 이루지 못하여 code 505가 부여되는 경우가 많은데, 기관별 차이를 줄이고 방법을 표준화하기 위한 노력들이 이루어져 왔다[7-9]. 대한진단검사정도관리협회 학술연구과제로 2019년에는 FCMXM 방법을 제안하고 다기관 검증을 시도하였고[8], 2021년에는 해당 방법을 사용하여 cut-off를 확립하고자 다기관 연구를 시행하였다[9]. 연구에서 도출된 방법이나 cut-off를 국내 모든 기관에 적용하기는 현실적으로 쉽지 않으나 다기관 연구를 통해서 그 가능성을 확인하였다. 현재까지 신빙도조사에서 FCMXM 결과의 분포를 볼 때 지속적인 기관 간 일치 및 표준화를 위한 노력이 있어야 하겠다.

HLA 항체 선별 및 동정검사는 Immucor Lifecodes사와 One Lambda사의 비드 기반 시약이 사용되어 왔으나 2021년부터는 Immucor Lifecodes사의 시약이 허가상의 문제로 국내 사용이 불가하게 됨에 따라 모든 기관이 One Lambda사의 시약을 사용하고 있다. 실제 비교할 수 있는 시약이 없으므로 항체 유무 결과 및 동정된 항체들의 종류나 양상의 적절성을 판별할 수 있는 절대적 기준은 없다. 단지 기관 간 항체 동정 시 판정기준을 일치시키고자 한다면 하나의 기회가 될 것이라고 생각하며, 그런 의미에서 각 기관에서 보고하는 항체 종류나 양상을 객관적으로 비교하는 것이 중요하다. 동정항원별 보고기관 수의 분포를 파악할 수 있는 통계시스템을 도입하였고 이를 분석하여 본 보고서에 기술하였는데, 해당 자료를 통해 consensus에 이르기 어려운 기관 수의 동정항원을 보고한 경우 문제가 있음을 추측할 수 있다 현재는 SABID의 경우 보고한 동정항원들에 대해서는 적합성 판정기준이 없는 상황이나 추후 판정기준 수립을 위한 기본 자료로 활용할 수 있을 것이다.

현재 신빙도조사 프로그램은 관리자 및 물질제조자를 각각 따로 또는 한 기관에서 두 가지 모두를 담당하는 전문가가 수행하고 있다. 저자는 대한진단검사의학회 정도관리분과에서 3년, 대한진단검사정도관리협회에서 5년간 조직적합성 검사 신빙도 프로그램을 운영하였는데, 새로운 검사법 및 프로그램 운영체계의 발전이 지속적으로 이루어져 왔지만, 여전히 과학적이고 체계적인 운용을 위한 배경지식, 기술, 안정적인 물적, 인적 지원이 필요하다고 생각한다. 또한 지속적이고도 실질적인 교육 및 연구를 통해 전반적인 검사의 질 개선과 발전이 이루어져야 할 것으로 생각한다.

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정도관리물질의 제조에 도움을 주신 박준우 병리사와 삼성서울병원 진단면역검사실 병리사들, 헌혈실 정혜경, 김혜미 간호사, 정미정 연구원 그리고 헌혈 공여자 처치에 참여해준 전공의들에게 감사의 뜻을 전합니다. 그리고 무엇보다 정도관리물질을 제공하기 위하여 공여자로 참여해준 많은 직원들 및 환자들에게 깊은 감사의 뜻을 전한다.

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Reference

Kang ES. Annual report of Korean Association of External Quality Assessment Service on histocompatibility testing (2018). J Lab Med Qual Assur 2019;41:130-52.
Marsh SG, Albert ED, Bodmer WF, Bontrop RE, Dupont B, Erlich HA, et al. Nomenclature for factors of the HLA system, 2010. Tissue Antigens 2010;75:291-455.
Lee KW, Park MH. New HLA nomenclature (2010) and its clinical application in Koreans. Korean J Lab Med 2010;30:203-17.
Wallace GR. HLA-B*51 the primary risk in Behcet disease. Proc Natl Acad Sci U S A 2014;111:8706-7.
Elfishawi M, Mossallam G, Augusto DG, Montero-Martin G, de Bruin H, Van de Pasch L, et al. Behcet disease, new insights in disease associations and manifestations: a next-generation sequencing study. Clin Exp Immunol 2021;204:144-51.
Park HJ, Kim YJ, Kim DH, Kim J, Park KH, Park JW, et al. HLA allele frequencies in 5802 Koreans: varied allele types associated with SJS/TEN according to culprit drugs. Yonsei Med J 2016;57:118-26.
Yu S, Kang ES, Park MH. A questionnaire survey of HLA crossmatch tests in Korea (2015). Lab Med Online:147-56.
Park Y, Park MH, Park BG, Oh EJ, Bang HI, Lee JH, et al. Multicenter verification of a harmonized test method for human leukocyte antigen flow cytometry crossmatching. J Lab Med Qual Assur 2021;43:152-61.
Bang HI, Park Y, Song EY, Oh EJ, Lee JH, Kang ES. Feasibility of establishing a common cut-off of human leukocyte antigen flow cytometry crossmatch using harmonized protocols in a multicenter setting. Lab Med Qual Assur 2022;44:204-11.